硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR）试剂盒可见分光光度法

硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR）试剂盒可见分光光度法说明书

可见分光光度法 50管/48样  

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

商品属性：

产品名称：硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR）试剂盒可见分光光度法

货号：LZ-S0126-A

规格 : 50管/48样

测试方法:可见分光光度法

产品分类：辅酶Ⅱ系列

发货地：上海

测定意义:

TrxR是一种NADPH依赖的包含FAD结构域的二聚体硒酶，属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员，与硫氧还蛋白以及NADPH共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxR与GR活性类似，催化GSSG还原生成GSH，是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。GR具有多种生物学功能，调节机体氧化还原反应和细胞生长与增殖，与人类某些疾病发病机制有关，可能是干预治疗的靶点。

测定原理:

TrxR催化NADPH将DTNB还原为TNB，通过测定412nm波长处TNB的增加量，即可计算TrxR活性。

实验中所需仪器及设备

可见分光光度计、低温离心机、可调节移液器、1ml比色皿、双蒸水

试剂的组成和配制:

试剂一：液体 90mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 5 mL 蒸馏水溶解。

粗酶液提取：

1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7秒，总时间 3min）；然后 8000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体：直接测定。

生化检测试剂盒操作步骤：

一、‌准备工具和环境‌：确保操作台面干净、整洁，这是进行科学实验的步。

‌二、‌仔细阅读说明书‌：这是使用试剂盒的基础，说明书包含了所有必要的信息和操作指南。

三、样本采集‌：按照说明书的指导，正确采集样本。不同类型的检测可能需要不同类型的样本，如血液、唾液或鼻涕等。

‌四、样本混合‌：将样本与试剂小心混合，注意轻柔操作，避免产生泡沫，以确保检测的准确性。

‌五、‌等待反应‌：混合后，耐心等待试剂盒的反应，这个时间可以用来进行其他活动，但不要着急，因为好的结果值得等待。

六、结果判读‌：时间到后，仔细判读结果。试剂盒通常会有明确的指示，告诉你如何根据显示的线条或颜色来判断结果。 

注意事项:

①加入试剂的顺序应一致,以所有反应板孔温育的时间一样。

②使用干净的塑料容器配置洗涤液。

③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。

⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。

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