KEA琼脂(不含糖)

产品名称：KEA琼脂(不含糖)

货号：LZ-PYJ3814

英文名称：KEA Agar

产品规格：250g

用途：用于食品、水和其它物质中肠球菌的分离培养和计数。

成分(g/L)：

蛋白胨 20.0

酵母浸粉 5.0

氯化钠 5.0

柠檬酸钠 1.0

叠氮化钠 0.15

卡那0.002

七叶苷 1.0

柠檬酸铁铵 0.5

琼脂 15.0

pH值7.1±0.2 25℃

KEA琼脂用法：称取本品47.65g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。

注:不要加热时间过长和过份加热。

主要包括：

计算—称量—溶解—调pH—分装—灭菌——倒平板等。

计算：，根据配方计算各种营养成分的用量。

称量：使用电子天平准确称取所需，遵循由含量低到含量高的称量原则。

溶解：将称好的成分放入相应玻璃容器中，加入所需量的水，加热使其完全溶解。对于液体培养基，建议使用纯化水。若配制固体培养基，则需称取适量的琼脂放进已称量好的培养基中，继续加热至琼脂全部溶解。

调pH值：待培养基稍冷却后，按配方要求调整pH值。使用10% NaOH溶液（或10% HCl溶液）调整所配培养基的pH。加碱（或酸）溶液时，应边滴加边搅拌，直至后调至要求的pH值。

分装：根据需要将培养基分装于不同的三角烧瓶、试管等。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。分装量根据使用目的和要求决定，但定量分装，便于应用。

灭菌：应按培养基配方中规定的条件及时进行灭菌。普通培养基采用121℃、15min高压湿热灭菌法，以灭菌效果和不损伤培养基的有效成份。

倒平板：灭菌后取出的固体培养基，根据需要可将试管立即斜放，冷凝后即成斜面培养基。液体培养基冷却后可直接根据需要接进菌种。

培养基此外，还包括一些注意事项和操作细节，如使用度1/100的电子天平称取、避免使用铜或铁的容器溶化培养基、调整pH时考虑高压灭菌后的pH变化等。

1、上海准备好干粉培养基、三角瓶、药勺、无菌平皿、油性笔等。在瓶身上标注好培养基的

相关信息。

2、将三角瓶置于电子天平上，调零。按照需要用量，用药勺把干粉培养基添加到三角瓶中。

3、称量之后及时盖上培养基瓶盖，拧紧。用量筒量取适量的蒸馏水或者去离子水。

4、先加入小部分水以湿润干粉，避免粉尘扬起。再加入剩余的水量。充分摇匀。

5、将培养基加热煮至沸腾三次，应可见溶液澄清透亮，无明显琼脂颗粒挂壁，分层等现象。

6、培养基塞上透气硅胶塞，包上牛皮纸或者报纸，包扎好。放入高压灭菌锅中灭菌。（按需设定灭

菌温度、时间）

7、暂时不使用的培养基，可以放入50℃烘箱或者水浴中保温。倒平板时，在超净工作台或

生物安全柜中准备好无菌平皿、记号笔等。

8、拆开包装后，将无菌培养皿倒置，在底部边缘写上平板相关信息。

9、将标记好的无菌平皿翻转过来，当培养基温度下降到50℃左右时，倾倒培养基。

10、倒完后可轻轻圆周摇晃平板三圈，使平板边缘整齐。将平板铺开可加速琼脂冷却凝固。

11、颗粒培养基使用之前，将平板倒置于无菌实验室内的烘箱中，55℃、15 分钟。烘干平板表面水分。

12、将暂时不使用的平板用报纸包成筒状，用记号笔标清楚平板的种类、配制日期。

13、然后放进2-8℃的冰箱中保存。用时取出放置室温下平衡，使用前50℃烘箱烘10 分钟。

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