威海标书代做公司标书制作六年经验

材料准备
1)应根据施工进度计划及时编制出所需的材料计划，以利及时供料。
2)做好自供材料的订货采购，进行市场调查，货比三家，选用合格产品。
3)本工程的周转材料一次性投入，确保工程进度。
（三）劳动力准备
本工程施工前须做好各类劳动力的组织、调配工作，确保劳动力的需要，使工程不至于因劳动力不足而停滞、脱节、影响工程施工，同时对劳动力实行动态管理，劳动力随施工进度和工程量大小有组织地调配进场，充分发挥自身队伍的技术和管理优势。

遵循“谁施工、谁负责”的原则，对各工序进行全面质量管理和追踪管理。凡在施工过程中违反操作规程，不按图施工，屡教不改或发生了质量问题，项目部有权进行处罚，处罚形式为整改、停工、罚款直至赶出本工地。
认真做好自检、专检、交接检，隐蔽工程验收先经公司主管工程师检查，达到要求方可报请甲方监理检查验收，未经验收不得进行下道工序施工。
加强测量放线工作，建立复测制度，确保建筑物轴线、中心线和标高偏差不超过图纸规定的要求。
混凝土浇铸是主要工序，应安排相对稳定的班组施工，施工前由项目工长对主要工序操作者进行操作规程和质量标准的书面交底。

招标文件要求的其他相关资料。
3、你方授权代表可调查、审核我方提交的与本申请书相关的声明、文件和资料，并通过我方的开户银行和客户，澄清本申请书中有关财务和技术方面的问题。本申请书还将授权给有关的任何个人或机构及其授权代表，按你方的要求，提供必要的相关资料,以核实本申请书中提交的或与本申请人的资金来源、经验和能力有关的声明和资料。
4、本申请充分理解下列情况：
（1）资格审查合格的申请人才有可能被授予合同；
（2）你方保留更改本招标项目的规模和金额的权利。前述情况发生时，投标仅面向资格审查合格且能满足变更后要求的投标申请人。

实验手段、关键技术等说明）；
【研究方案】
分为预初实验和正式实验两个阶段
阶段：预初实验阶段
1、体内实验
动物分组：
：用百草枯造模，根据补阳还五汤给药剂量的不同将90只大鼠随即分为三组，每组30只。三种药物剂量分别为：0.4mg/kg、0.6mg/kg和0.8mg/kg，造模当日开始给药直至处死。然后：每组再根据观察持续时间的不同分为三个亚组，每组10只。分别观察至28、56和112天。
观察指标：
1）动物存活率
2）动物血标本：检测各组动物血常规、肝、肾功能变化
3）动物肺组织病理标本：HE染色，光镜下观察组织结构、细胞形态等变化，以评价药物对肺组织的影响。
2、体外实验：
取动物肺组织，分离和培养肺泡巨噬细胞和成纤维细胞，采用 HE 染色法观察肺组织肺泡炎程度，RT-PCR技术观察肺组织病理及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA，Smad3mRNA 的表达。观察不同浓度的补阳还五汤对肺组织的影响差异，同时观察补阳还五汤的体外细胞毒性作用。
3、分析决策：
综合分析体内、体外研究结果，选择动物存活率高，肺组织病理变化轻，毒性反应轻的剂量为佳给药剂量。

【技术关键】
实验部分的技术关键：
体内实验：
1、百草枯致肺纤维化动物模型的成功建立：国内外已有十分成熟的方法。成功的关键在于给药方法和药物在肺内的均匀分布。目前常用的方法有气管插管注入、雾化吸入、气管穿刺注入和动脉灌注等方法。根据前期实验的经验，气管插管注入法简单、方便、对动物损伤小，只要操作熟练，可确保药物准确到位。注药后立即将动物体位旋转，可使药物分布均匀。
2、本研究需要观察动物的存活时间较长，对饲养环境要求较高，同济大学医学院可以提供符合要求的实验场所
3、补阳还五汤对动物重要脏器功能的影响需要进行肝、肾功能等检测。用正常大鼠建立正常值范围。
体外实验：
1. 肺内各种细胞的培养技术基本成熟，我院已具备符合要求的细胞培养条件
2. 补阳还五汤对体外培养细胞毒性的检测方法基本具备

关于细胞凋亡的检测：主要问题是细胞凋亡判断标准和定量分析。前述任何一个指标单使用，均不能准确的反映细胞凋亡的真实情况，将几种方法结合运用则可相互取长补短，较为的定性、定量。因此，本研究采取多种方法联合应用，从不同角度证明细胞凋亡事件是否发生、发生的时期和严重程度。如：（1）检测细胞水平和亚细胞水平的形态学变化：用光镜可观察到细胞变小，胞质浓缩，核染色质浓缩并边缘化，核片段形成和凋亡小体形成；用电镜可观察超微结构的变化，如胞膜微绒毛变少和消失等。（2）根据生化指标变化：如 DNA 片段化的形成，应用原位缺口翻译技术（TUNEL）进行定性和定量检测。在定量分析时，DNA断裂点形成是目前常用的判断标准，TUNEL是凋亡检测，特别是定量分析中主要的方法。（3）利用分子生物学指标：主要指凋亡相关基因及其表达产物的检测。本研究选择多个促凋亡基因和抗凋亡基因同时检测，提高准确性；选择反映不同凋亡时期的新检测指标，更地帮助判断凋亡事件发生的早晚。（4）利用流式细胞术：流式细胞术是研究程序性细胞死亡时细胞许多特性的一种重要的定性、定量分析技术。当细胞凋亡时，细胞膜的通透性增加，小分子 DNA片段丢失，用 DNA特异性荧光染料进行染色后，凋亡细胞的染色程度下降，通过流式细胞仪进行 DNA 含量的检测，可以鉴定出凋亡的细胞。利用流式细胞术结合新的研究方法，还可分辨出早期凋亡和晚期凋亡的细胞，如进行 BALF中凋亡细胞磷脂酰丝氨酸外翻分析和凋亡细胞线粒体膜势能的检测等。技术关键在于：需保持检测标本呈单细胞悬液状态，不至于凝聚成团；活细胞与死细胞的鉴别以及早期凋亡和晚期凋亡细胞的鉴别，都需要不同的检测方法和