结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)

结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)

货号：LZ-PYJ3682

英文名称：Violet Red Bile Agar

产品规格：250g

用途：用于大肠菌群的固体平板检测。

成分(g/L)：

蛋白胨 7.0

酵母粉 3.0

氯化钠 5.0

乳糖 10.0

胆盐 1.5

结晶紫 0.002

中性红 0.03

琼脂 15.0

pH值7.4±0.1 25℃

用法：称取本品41.5g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，煮沸不要超过2分钟。取适宜稀释度样品液1ml，加入到无菌平皿中心，将冷至45±0.5℃的VRBA 10-15ml倾注于平皿中。小心旋转平皿将培养基与样液充分混匀。凝固后，再加3-4ml VRBA覆盖平板表层，翻转平板，

配制过程中的常见问题分析：

01 培养基颜色不正确

（1）含有酸碱指示剂的培养基，若颜色不正确，通常是由于pH不正确导致的，加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。

（2）加热过度导致某些成分分解或糖焦化，如SC培养基(SC增菌液)加热过度会变红，含糖量高的培养基，加热过度通常会出现颜色加深，呈焦糖色或棕褐色。

（3）某些成分变质，如血液久置易变黑，制成的平板颜色偏棕黑色。

02 培养基不凝固或凝固性差

（1）颗粒培养基称量错误

（2）琼脂分布不均匀

（3）培养基pH不正确

（4）培养基加热过度

（5）琼脂量不足

03 培养基产生沉淀

（1）某些培养基原本就含有不溶性沉淀，如TTB，MC培养基等，配方中含有大量不溶性碳酸钙。

（2）灭菌前未充分溶解，若灭菌前溶解不充足，灭菌后就会出现大量沉淀。

（3）pH不正确，偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。

（4）水的纯度不够，天然水中含有较多的矿物盐离子，若未除净，则易与培养基中反应生成沉淀。

（5）添加剂加入温度不正确，卵黄、血液等对温度敏感的添加成分，若加入时温度过高或温差过大，易出现凝块。

（6）称量错误。

（7）试剂加入顺序不正确。

注意事项：

1）培养基尽量使用新鲜培养基，2～4h内用完；

2）上海应使用预还原培养基，预还原24～48h更好；

3）可采用预还原灭菌法制作的培养基（用前于培养基中加入还原剂，如L-半胱氨酸、维生素C等，尽可能使预还原剂处于还原状态）；

4）液体培养基应煮沸10min，以驱除溶解氧，并迅速冷却，立即接种医。学教育网搜集整理；

5）厌氧菌的培养基均应营养丰富，并加有还原剂与生长刺激因子（血清、维生素K、氯化血红素、聚山梨酯-80等）。

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