本溪标书制作公司标书制作加急出稿
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一是施工地点在宁马高速和沪宁高铁之间,施工和管理都存在一定难度。
二是质量要求高。此项工程主要由立柱构成,立柱的坚固、耐久程度在很大程度上取决于基础。正象古埃及的金字塔一样,如果没有坚实的基础,怎能万古千秋?另外,基础的预埋件位置如果不准,柱体就难以施工建设。因此,这项工程的质量要求及精度要求是很高的。
三是工期紧。仅4个月的时间,完成这些工程,如果不采取有力措施,是难以实现的。
四是水源、电源、道路情况各不相同,有的地方根本无电无水也无路,施工、运输势必增加工程费用。
五是征地和施工几乎同步进行,工作集中,若不妥善安排,必将顾此失彼。
基于以上情况,要作好思想准备、工作安排准备、物资材料准备和道路交通准备,作到万无一失。
第二阶段:正式实验阶段
1、动物分组:
(1)根据不同的处理因素,将1050只大鼠随即分为七组,每组150只:
1) 空白对照组(n=150):仅用生理盐水处理
2)PQ致肺纤维化模型组:按照文献方法制作百草枯致肺纤维化动物模型
3)补阳还五汤处理对照组(n=150):用预初实验选定的补阳还五汤剂量处理动物
4)地塞米松处理对照组(n=150):用地塞米松处理动物
5) PQ+补阳还五汤治疗组(n=150):同百草枯模型组造模。以后用预初实验选定的补阳还五汤剂量处理动物
6) PQ+地塞米松治疗组(n=150):同百草枯模型组造模。以后用地塞米松处理动物
7) PQ+小剂量DXM+小剂量补阳还五汤治疗组(n=150):同PQ模型组造模。以后用相当于第4)组半量的地塞米松(5mg/kg)和第 3)组半量的补阳还五汤处理动物
(2)再根据造模后不同的给药时间点,将每组再分为A、B、C、D、E五个亚组,每组五个亚组,每组30只:A:当日给药组B:7天给药组C:14天给药组D:28天给药组E:56天给药组
(3)后将每个亚组再根据给药后观察时间长短分为3组,每组10只。
2、观察项目:
(1)动物存活率
(2)肺组织病理标本:
1)大体标本观察:各组肺组织的大小、颜色、弹性、胶原形成情况等
2)病理切片观察:
a、HE染色,光镜下观察肺泡炎症和纤维化程度,特别关注成纤维细胞灶形成情况;
【技术关键】
实验部分的技术关键:
体内实验:
1、百草枯致肺纤维化动物模型的成功建立:国内外已有十分成熟的方法。成功的关键在于给药方法和药物在肺内的均匀分布。目前常用的方法有气管插管注入、雾化吸入、气管穿刺注入和动脉灌注等方法。根据前期实验的经验,气管插管注入法简单、方便、对动物损伤小,只要操作熟练,可确保药物准确到位。注药后立即将动物体位旋转,可使药物分布均匀。
2、本研究需要观察动物的存活时间较长,对饲养环境要求较高,同济大学医学院可以提供符合要求的实验场所
3、补阳还五汤对动物重要脏器功能的影响需要进行肝、肾功能等检测。用正常大鼠建立正常值范围。
体外实验:
1. 肺内各种细胞的培养技术基本成熟,我院已具备符合要求的细胞培养条件
2. 补阳还五汤对体外培养细胞毒性的检测方法基本具备