大同标书制作公司标书制作废标退款

企业管理机制
1、我公司是股份责任公司，董事会是高权力机构，董事长兼总经理负责全面企业经营活动。
2、公司实行两级管理，两级核算即（公司、项目经理部），在工程施工过程中，公司、项目经理部、施工队栋号工程实行各自的责任制。工程质量、安全生产、文明施工、工程成本由公司、项目经理部分层管理，并有严密的各项管理制度和有力的控制措施手段，做到施工管理层层有人抓，级级有人管的岗位负责制。
3、财务工作，工程款使用由公司监督，项目经理部控制，栋号专款，做到工程款按规定使用，即按工程进度和工程所需合理使用，不外流，杜绝工程不施工工程款花光或其它占用的现象发生，工程顺利进行，企业和单位的利益不受损失。

凡进人本工地的工人，经过三级教育(公司、项目经理部、施工队)后，方能进入施工现场。进入施工现场后，要介绍本工程概况和建筑施工的特点，以及它给劳动者的安全带来的不利因素。当工人掌握要领后方准操作。建立安全监督控制小组，指导工地安全施工。
实行层层负责制，即各工种小组长负责本组职工的安全，师傅负责徒弟的安全，技工负责力工的安全等，确保该工程安全顺利进行施工。
施工现场负责人及施工人员认真贯彻执行“安全、预防为主”的方针。
临时用电采用三级配电，二级保护，从配电箱到用电设备不得使用刀闸，要求全部使用空气开关，并设置漏电保护器。

实验手段、关键技术等说明）；
【研究方案】
分为预初实验和正式实验两个阶段
阶段：预初实验阶段
1、体内实验
动物分组：
：用百草枯造模，根据补阳还五汤给药剂量的不同将90只大鼠随即分为三组，每组30只。三种药物剂量分别为：0.4mg/kg、0.6mg/kg和0.8mg/kg，造模当日开始给药直至处死。然后：每组再根据观察持续时间的不同分为三个亚组，每组10只。分别观察至28、56和112天。
观察指标：
1）动物存活率
2）动物血标本：检测各组动物血常规、肝、肾功能变化
3）动物肺组织病理标本：HE染色，光镜下观察组织结构、细胞形态等变化，以评价药物对肺组织的影响。
2、体外实验：
取动物肺组织，分离和培养肺泡巨噬细胞和成纤维细胞，采用 HE 染色法观察肺组织肺泡炎程度，RT-PCR技术观察肺组织病理及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA，Smad3mRNA 的表达。观察不同浓度的补阳还五汤对肺组织的影响差异，同时观察补阳还五汤的体外细胞毒性作用。
3、分析决策：
综合分析体内、体外研究结果，选择动物存活率高，肺组织病理变化轻，毒性反应轻的剂量为佳给药剂量。

第二阶段：正式实验阶段
1、动物分组：
（1）根据不同的处理因素，将1050只大鼠随即分为七组，每组150只：
1) 空白对照组（n=150）：仅用生理盐水处理
2)PQ致肺纤维化模型组：按照文献方法制作百草枯致肺纤维化动物模型
3)补阳还五汤处理对照组（n=150）：用预初实验选定的补阳还五汤剂量处理动物
4)地塞米松处理对照组（n=150）：用地塞米松处理动物
5) PQ+补阳还五汤治疗组（n=150）：同百草枯模型组造模。以后用预初实验选定的补阳还五汤剂量处理动物
6) PQ+地塞米松治疗组（n=150）：同百草枯模型组造模。以后用地塞米松处理动物
7) PQ+小剂量DXM+小剂量补阳还五汤治疗组（n=150）：同PQ模型组造模。以后用相当于第4）组半量的地塞米松（5mg/kg）和第 3）组半量的补阳还五汤处理动物
（2）再根据造模后不同的给药时间点，将每组再分为A、B、C、D、E五个亚组，每组五个亚组，每组30只：A:当日给药组B:7天给药组C:14天给药组D:28天给药组E:56天给药组
（3）后将每个亚组再根据给药后观察时间长短分为3组，每组10只。
2、观察项目：
（1）动物存活率
（2）肺组织病理标本：
1）大体标本观察：各组肺组织的大小、颜色、弹性、胶原形成情况等
2）病理切片观察：
a、HE染色，光镜下观察肺泡炎症和纤维化程度，特别关注成纤维细胞灶形成情况；

【技术关键】
实验部分的技术关键：
体内实验：
1、百草枯致肺纤维化动物模型的成功建立：国内外已有十分成熟的方法。成功的关键在于给药方法和药物在肺内的均匀分布。目前常用的方法有气管插管注入、雾化吸入、气管穿刺注入和动脉灌注等方法。根据前期实验的经验，气管插管注入法简单、方便、对动物损伤小，只要操作熟练，可确保药物准确到位。注药后立即将动物体位旋转，可使药物分布均匀。
2、本研究需要观察动物的存活时间较长，对饲养环境要求较高，同济大学医学院可以提供符合要求的实验场所
3、补阳还五汤对动物重要脏器功能的影响需要进行肝、肾功能等检测。用正常大鼠建立正常值范围。
体外实验：
1. 肺内各种细胞的培养技术基本成熟，我院已具备符合要求的细胞培养条件
2. 补阳还五汤对体外培养细胞毒性的检测方法基本具备

关于细胞凋亡的检测：主要问题是细胞凋亡判断标准和定量分析。前述任何一个指标单使用，均不能准确的反映细胞凋亡的真实情况，将几种方法结合运用则可相互取长补短，较为的定性、定量。因此，本研究采取多种方法联合应用，从不同角度证明细胞凋亡事件是否发生、发生的时期和严重程度。如：（1）检测细胞水平和亚细胞水平的形态学变化：用光镜可观察到细胞变小，胞质浓缩，核染色质浓缩并边缘化，核片段形成和凋亡小体形成；用电镜可观察超微结构的变化，如胞膜微绒毛变少和消失等。（2）根据生化指标变化：如 DNA 片段化的形成，应用原位缺口翻译技术（TUNEL）进行定性和定量检测。在定量分析时，DNA断裂点形成是目前常用的判断标准，TUNEL是凋亡检测，特别是定量分析中主要的方法。（3）利用分子生物学指标：主要指凋亡相关基因及其表达产物的检测。本研究选择多个促凋亡基因和抗凋亡基因同时检测，提高准确性；选择反映不同凋亡时期的新检测指标，更地帮助判断凋亡事件发生的早晚。（4）利用流式细胞术：流式细胞术是研究程序性细胞死亡时细胞许多特性的一种重要的定性、定量分析技术。当细胞凋亡时，细胞膜的通透性增加，小分子 DNA片段丢失，用 DNA特异性荧光染料进行染色后，凋亡细胞的染色程度下降，通过流式细胞仪进行 DNA 含量的检测，可以鉴定出凋亡的细胞。利用流式细胞术结合新的研究方法，还可分辨出早期凋亡和晚期凋亡的细胞，如进行 BALF中凋亡细胞磷脂酰丝氨酸外翻分析和凋亡细胞线粒体膜势能的检测等。技术关键在于：需保持检测标本呈单细胞悬液状态，不至于凝聚成团；活细胞与死细胞的鉴别以及早期凋亡和晚期凋亡细胞的鉴别，都需要不同的检测方法和