人黏附分子ICAM基因PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：人黏附分子ICAM基因PCR检测试剂盒

产品货号：LZ-P1769

分类：PCR检测试剂盒

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光。

有效期：一年

实验步骤：

一．样品制备

1．PCR扩增并检测。根据不同的引物挑选适合的退火温度进行PCR扩增。扩增产物用2-2.5%的琼脂糖胶跑水平电泳检测，上样量3-5ul。PCR产物为10ng/nl左右为佳。

2．PCR产物与变性buffer混合。在干净的PCR管底部加入5ul SSCP上样缓冲液（变性缓冲液，同《分子克隆》中的测序缓冲液），然后在缓冲液中央加入PCR扩增产物。按照经验，扩增效果在琼脂糖胶上能看出比较亮的带的样品加1ul，效果很好加0.5ul，如果不太好就适当增加1.5、2或3不等，同时加大上样缓冲液的量，比如加3ul的PCR产物，缓冲液加到8ul变性效果更好。

3．PCR产物变性。加好的样品进行离心，使样品集中在管底。PCR仪上95℃变性10分钟，立即取出PCR产物连同架子一同置于冰上静置5min，以免变性的产物复性。

如何进行 PCR 实验？

一、ICAM基因PCR准备实验材料（1）DNA模板：包含你想要复制的DNA区域。上海（2）引物：短的单链DNA片段，用于指导DNA合成的起始位置。（3）DNA聚合酶：一种酶，用于合成DNA。（4）四种脱氧核苷酸（dNTPs）：DNA的构建块。（5）缓冲液：提供适宜的反应环境。（6）镁离子或其它必需的离子：通常作为DNA聚合酶的辅助因子。二、设定反应混合物将所有材料混合在微量离心管中。混合物的总体积通常在20-50微升之间。

1. 3. PCR程序（1）将混合物放入PCR机（热循环仪）中，并设定程序。PCR程序通常包括以下阶段：（2）初次变性：加热至94-98°C，持续几分钟，使DNA双链解开成单链。（3）循环步骤（通常进行30-40次循环）：（4）变性阶段：加热至94-98°C，持续20-30秒，使DNA双链解开。（5）退火阶段：降温至50-65°C，持续20-40秒，允许引物与模板DNA结合。（6）延伸阶段：加热至72°C，持续1分钟每1千个碱基，以便DNA聚合酶合成新的DNA链。（7）后延伸：在72°C下持续5-10分钟，确保所有可用的DNA模板都被复制。（8）保持阶段：将温度降至4-15°C，直到用户准备取出样品。

PCR实验的基本步骤：

DNA聚合酶是实验室中常用的生物学酶之一，在PCR实验中具有重要的作用。实验室常用的DNA聚合酶，包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。

一、Taq聚合酶：

Taq聚合酶是由Thermus aquaticus细菌产生的一种DNA聚合酶，在分子生物学研究中得到广泛应用。Taq聚合酶具有热稳定性，可以在高温条件下保持活性，这是由于其来源于热液生物，能够存活和正常活动于高温环境。这使得Taq聚合酶在聚合酶链式反应（PCR）中起到关键的作用。Taq聚合酶能够按照DNA模板合成新的DNA链，因此在PCR中用于扩增目标DNA片段。然而，Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性，导致其生成的PCR产物末端容易出现额外的腺嘌呤碱基。因此，在某些应用中，需要使用具有外切酶活性的聚合酶。

二、PCR检测试剂盒Pfu聚合酶：

Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus细菌产生的一种DNA聚合酶。与Taq聚合酶相比，Pfu聚合酶具有更高的热稳定性和耐酶性。这使得Pfu聚合酶在高温PCR反应中表现出色，其高度稳定的酶活性能够确保PCR反应的可靠性和准确性。此外，Pfu聚合酶还具有3'-5'外切酶活性，可以修复并纠正PCR反应中的腺嘌呤碱基误配，有效防止误差累积。因此，Pfu聚合酶适用于需要高度准确的PCR扩增和DNA测序。

三、Tth聚合酶：

Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8细菌产生的一种DNA聚合酶。与Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同，Tth聚合酶具有热活性反转转录酶活性，可以将RNA模板合成相应的DNA链。因此，Tth聚合酶在逆转录PCR（RT-PCR）中得到广泛应用，用于将RNA转录成DNA，并通过增加热活性酶来实现PCR扩增。此外，Tth聚合酶还具有一定的外切酶活性，可用于修复和校正PCR产物的末端。

10-羟基喜树碱 67656-30-8 检测用对照品 无

银叶巴豆Croton cascarilloides 3,4,5-氧基本基 beta-D-葡萄糖苷 41514-64-1 C15H22O9 ≥95% 锡精矿成分分析标准物质(G072 2

对照品琥珀酸甲泼尼龙100827-200501含量测定(HPLC)

Powdered Andrographis Exact穿心莲提取物标准品90244-84-1500mg穿心莲提取物标准品

蟛蜞菊 Wedelia chinensis (Osbeck.) Merr. Demetxylwedelolactone 异去甲蟛蜞菊内酯 6468-55-9 C15H8O7 ≥98%

刺桐Erythrina arborescens Orientanol A none 190381-82-9 C21H24O7 ≥95%

L-天冬安醋L-cspcicccid200mg/支

华北卫矛Euonymus maackii iptohypol F 3BETA-轻基-11ALPHA-甲氧基-齐墩果-12-烯 268541-26-0 C31H52O2 标准黏度液1 0049

中药对照药材玳瑁121284-200401TLC法鉴别

Daphnetin祖师麻甲素 度：≥98%

人参皂苷F5 Ginsenoside F5 (≥98%,HPLC) Null A1431 标准品

猪屎豆Crotalaria pallida 5,7-二轻基-2-[4-轻基-3,5-双(3-甲基-2--基)本基]-4H-1-本并-4-同 114542-44-8 C25H26O5 ≥98% RHAMNOSE, L-(+-(P18211-250

DL-MentholDL-薄荷醇89-78-120mg/支

Allantoin尿囊素标准品97-59-6200mg

穿心莲Andrographis paniculata 14-Deoxy-11,12-didexy7noandrographiside 14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷 141973-41-3 C26H38O9 ≥95%

人黏附分子ICAM基因PCR检测试剂盒小鼠S100钙结合蛋白A9(S100A9)ELISA试剂盒 ，英文名： S100A9 ELISA Kit

人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA检测试剂盒HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 96T/48T

大鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)试剂盒 Rat melanocyte aibody,MC Ab ELISA Kit

英文名称Rat17-ANPELISAKit大鼠17-羟-孕同(17-ANP)规格：96T/48T

裂解液VII：细菌裂解溶液20ಉ㒠ಉ