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人D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒灵敏度高

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人D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒 灵敏度高



ELISA检剂盒应用定性夹心检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,这些就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与次孵育结合上的HEV IgM相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgMelisa试剂盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。






 



1、 :操作中避免任何细胞。使用不含热原和的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。


2、 :EDTA柠檬酸盐肝素可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。


3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。


4、 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。


5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


此IBL试剂盒能用于小鼠,EDTA,细胞上清中白介素-6的定量检测


试剂盒成分


1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T


2 酶标记: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1


3 品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2


4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1


5 标记稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1


6 显色剂: TMB底物液 15mL x 1


7 终止液: 1N 12mL x 1


8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记和显色剂)





人D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒 灵敏度高


Elisa生物试验是一种性高,特强,重复性好的实验诊断。由于其试剂、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在学检验的各领域中。ELISA检剂盒适用于体外定性检测人或中的抗人类戊型(HEV) IgM ELISA检测。


主要设备




试剂


(1) 包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液):


Na2CO3 1.59克


NaHCO3  2.93克


蒸馏水至1000ml


(2) 洗涤缓冲液(PH7.4PBS):0.15M


KH2PO4  0.2克


Na2HPO4·12H2O 2.9克


NaCl 8.0克


KCl 0.2克


Tween-20 0.05% 0.5ml


加蒸馏水至1000ml


(3) 稀释液


牛白蛋白(BSA) 0.1克


加洗涤缓冲液至100ml


或以羊、兔等与洗涤液配成5~10%使用。


(4) 终止液(3M H2SO4):


蒸馏水178.3ml,逐滴加入(98%)21.7ml。


(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸):


0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml


0.1M柠檬酸(19.2克/L)  24.3ml


加蒸馏水50ml。


(6) TMB(四联苯胺)使用液:


TMB(10mg/5ml无水)0.5ml


底物缓冲液(PH5.5)  10ml


0.75%H2O2   32μl


(7) ABTS使用液:


ABTS 0.5mg


底物缓冲液(PH5.5)  1ml


3%H2O2   2μl


(8) 抗原、和酶标记。


(9) 正常人和阳性对照。


器材


(1) 聚塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。


(2) 小烧杯玻璃棒、试管、吸管和量筒等。


(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。




 


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