鸭乙型肝炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

产品名称：鸭乙型肝炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

英文名称：Duck Hepatitis B Virus cccDNA(DHBV cccDNA)cccDNA

产品货号：LZ-P3475

分类：PCR检测试剂盒

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光，快递免费送货上门。

PCR检测试剂盒有效期一般为1年，这是指在适当的储存温度下。核酸扩增部分的试剂一般要贮存于-20℃下，产物检测部分试剂则贮存于2-8℃。尽量避免反复冻融。北京

【结果分析条件设定】

鸭乙型肝炎病毒u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。

u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的高点。

【质控标准】

1.  阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；

2.   阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；

3.   以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。

【结果判断】

1.阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；

2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；

3.   阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。

PCR反应的特异性决定因素为：

　　　①引物与模板DNA特异正确的结合；

　　　②碱基配对原则；

　　　③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

　　　④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，探针法荧光定量PCR其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4)对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

公司正在出售的产品：

人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)ELISA

小鼠α1抗胰糜蛋白酶(AACT)试剂盒 Mouse Alpha1 Aichymoypsin,AACT ELISA Kit

细胞角蛋白20(CK-20)PCR检测试剂盒 ， CK-20 ELISA Kit

MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFPCR检测试剂盒小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)PCR检测试剂盒

ELISAKitColⅠ兔子Ⅰ型胶原规格：48T/96T

Duckviruseeritis,DEVELISAKit鸭病毒性肠炎病毒(DEV)PCR检测试剂盒

Anti-Phospho-Histone H3 (Thr3)/FITC 荧光素标记0酸化组蛋白3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-PAK2 /FITC 荧光素标记p21激活激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ATH III 抗凝血酶3抗体 规格 0.2ml

GLP-1(Glucagon-like peptide-1)(7-36)peptide 胰高血糖素样肽-1(多肽) 0.1mg

phospho-GATA1(ser142) 英文名称： 0酸化珠蛋白转录因子1抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgM/Bio 生物素标记的兔抗小鼠IgM 规格 0.3ml

Anti-PAK2 /FITC 荧光素标记p21激活激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

鸭乙型肝炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit 人雌激素诱导蛋白PS2Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-MAG-a/L-MAG 髓鞘相关糖蛋白-a抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh KDM1 组蛋白赖酸特异性脱甲基酶1抗体 规格 0.1ml

ADV-IgG(Human Adenovirus IgG) ELISA Kit 人腺病毒IgG 96T

PDXK 英文名称： 吡哆醛激酶抗体 0.2ml

CENPH 英文名称： 着丝粒蛋白H抗体 0.2ml

Anti-MAG-a/L-MAG 髓鞘相关糖蛋白-a抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

PCR检测步骤:

1、样品处理

1）按照GB 4789.10-2016（或SN/T 1870-2016），取样品25g（mL），加入到含有225mL 7.5% NaCl肉汤的无菌容器中均质，调节pH至6.8±0.2。

2）36±1℃培养18-24h。

注：也可参考其他地方标准进行样品的前处理。

2、核酸提取

1）取40μL增菌液于裂解液管中，98℃或沸水浴10min。

2）冷却至室温，吸取上清备用或者置于-20℃保存。

3、反应体系配置

从试剂盒中取出SA预混液，充分融化，短暂离心，然后将阴性对照、样品的DNA提取液、阳性对照各取5μL分别加入PCR管中，盖好管盖，短暂离心，立即进行PCR扩增反应。

4、PCR扩增

PCR管置于PCR仪上，推荐反应程序设定如下：反应体系为25μL，在第二步每个循环60℃时检测荧光信号，检测通道选择FAM。