牛泛素A52残留核糖体蛋白融合产物1(UBA52)ELISA试剂盒
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≥ 1盒¥2400.00
牛泛素A52残留核糖体蛋白融合产物1(UBA52)ELISA试剂盒
牛泛素A52残留核糖体蛋白融合产物1(UBA52)ELISA试剂盒
辣根过氧化物酶:过氧化物酶(HRP)广泛分布于植物中,辣根中含,从辣根中提取的称辣根过氧化物酶(HRP),是由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉构成的一种糖蛋白(含糖量18%),分子量约40 000,约由300个酸组成,等电点为pH 3-9,催化反应的适pH值因供氢体不同而稍有差异,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%饱和度以下的铵溶液。酶蛋白和辅基吸收光谱分别为275nm和403nm。
操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为 0 的品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有组分使用充分摇匀。
6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。
7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。
8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤 1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。 2. 设置品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;品孔各加不同浓度的品 50μL; 3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL; 4. 随后品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测 50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。 5. 弃去,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗 板 5 次(也可用洗板机洗板)。 6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 7. 所有孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。 结果判断 绘制曲线:在Excel工作表中,以品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
免责声明
试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。 严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
牛泛素A52残留核糖体蛋白融合产物1(UBA52)ELISA试剂盒
双夹心ELISA:此法与双夹心ELISA的主要区别在于:它是采用酶标抗检查多种大分子抗原,它不仅不必标记每一种,还可试验的性。此法的基本程序为:① 加(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特(Ab-2)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加入酶标抗Ab-2(AB-3)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。