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过氧化氢酶(CAT)试剂盒(紫外吸收法)微量法

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过氧化氢酶(CAT)试剂盒(紫外吸收法)微量法说明书

微量法 100管/96样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

商品属性:

产品名称:过氧化氢酶(CAT)试剂盒(紫外吸收法)微量法

货号:LZ-S0147

规格 : 100管/96样

测试方法:微量法

产品分类:氧化与抗氧化系列

发货地:上海

测定意义:

CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是主要的 H2O2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。


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测定原理:

H2O2在 240nm 下有特征吸收峰,CAT 能够分解 H2O2,使反应溶液 240nm 下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、

研钵、冰和蒸馏水

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

工作液:液体 24mL×1 瓶,4℃保存

粗酶液 的提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。2、血清(浆)样品:直接检测。


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生化检测试剂盒操作步骤:

一、‌准备工具和环境‌:确保操作台面干净、整洁,这是进行科学实验的步。

‌二、‌仔细阅读说明书‌:这是使用试剂盒的基础,说明书包含了所有必要的信息和操作指南。

三、样本采集‌:按照说明书的指导,正确采集样本。不同类型的检测可能需要不同类型的样本,如血液、唾液或鼻涕等。

‌四、样本混合‌:将样本与试剂小心混合,注意轻柔操作,避免产生泡沫,以确保检测的准确性。

‌五、‌等待反应‌:混合后,耐心等待试剂盒的反应,这个时间可以用来进行其他活动,但不要着急,因为好的结果值得等待。

六、结果判读‌:时间到后,仔细判读结果。试剂盒通常会有明确的指示,告诉你如何根据显示的线条或颜色来判断结果。 

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注意事项:

①加入试剂的顺序应一致,以所有反应板孔温育的时间一样。

②使用干净的塑料容器配置洗涤液。

③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。

⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。


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