LMP7/PSMB9低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9ELISA试剂盒
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实验目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中LMP7/PSMB9低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9的含量。
实验原理：
上海试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被LMP7/PSMB9低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中LMP7/PSMB9低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度
试剂盒组成：
操作步骤：
LMP7/PSMB9 试剂盒方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。
2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
5. 终止反应：于各反应孔中加入2M0.05ml。
6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
LMP7/PSMB9 ELISA方法二 用于检测未知抗体的间接法：
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
注意事项：
1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在酶联ELISA试剂盒中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:
(1) 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚、聚、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
（2) 包被抗体(或抗原)的选择：将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg／ml等)进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择：用直接ELISA检测试剂盒法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。
公司正在出售的产品：
英文名称HumanPAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISAKit
ANP32A重组人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CRABP1重组人 CRABP1 / RBP5 蛋白 Protein
猪促肾上腺皮质激素(ACTH)试剂盒 Pig adrenocoicoopic hormone,ACTH ELISA kit
人基质金属蛋白酶1(MMP-1)试剂盒 Human Maix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA kit
人桥粒芯糖蛋白-3(Dsg-3)ELISA试剂盒
人过氧化脂质(LPO)试剂盒 Human lipid peroxide,LPO ELISA kit
CD3E Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 蛋白 (Fc 标签)
CD244 Protein Human 重组人 2B4 / SLAMF / CD244 蛋白 (Fc 标签)
ANP32A重组人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CD7 Protein Mouse 重组小鼠 CD7 蛋白 (His 标签)
人冷球蛋白(CG)ELISA 试剂盒
Mouseierferon-inducibleprotein10,IP-10ELISA试剂盒小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒
化受体底物1抗体
20号染色体开放阅读框134抗体
EGF应答因子1抗体抗体 Anti-ZFP36L1 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
4-磷脂酰5激酶1样蛋白抗体
正常乳腺组织
FAM134C蛋白抗体
转移生长因子β3抗体（TGFβ3）
神经丝蛋白抗体
TNFRSF1B重组人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 (His 标签) Protein
IDS Protein Human 重组人 Iduronate 2-Sulfatase / IDS 蛋白 (His 标签)
LMP7/PSMB9低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9ELISA试剂盒异(iso-Hyd)ELISA试剂盒 ，英文名： iso-Hyd ELISA Kit