兔细胞角蛋白19(CK-19/KRT19)ELISA试剂盒

兔细胞角蛋白19(CK-19/KRT19)ELISA试剂盒

实验原理

    ELISA运用了学原理和化学反应显色原理，需要将抗原或预包被在固相载体表面，使后来形成的抗原--酶 (荧光基团) -底物复合物黏附在载体上，通过检测OD值或发光值，来检测靶蛋白的含量。

ELISA试剂盒的用法包括以下步骤：1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml，酶标板中每孔加入50μl，室温、4℃或37℃过夜包被。2.洗涤：弃包被液（拍干，再用无尘纸吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次（每孔均要加满），每次3min~5min。3.封闭：每孔加封闭液（1%BSA）250μl，37℃封闭2h。4.洗涤：用1×PBST洗涤液洗板3次，每次3min~5min。5.加样：加入已经稀释好的样品，37℃反应1h。一般样本加入50-100μl，充分混匀。6.洗涤：用洗涤液洗板3次，每次3min~5min。7.加入酶标试剂：每孔加入100μl酶标溶液，37℃，1h。8.洗涤：用洗涤液洗板3次，每次3min~5min。9.显色：每孔先加入显色剂A液50μl，再加入显色剂B液50μl，37℃避光10-15min。10.终止及测定：加入50μl终止液，终止反应，用酶标仪在450nm波长处测OD值。

90分钟一步法ELISA试剂盒可以适用于、、组织匀浆、细胞上清液等样本类型。这些样本可以用于检测、和其他微生物等病原体，以及、自身性等病理情况。同时，ELISA试剂盒还可以用于检测浓度、维生素等营养，以及污染物等有害的残留量。需要注意的是，不同样本类型和检测项目可能对ELISA试剂盒的灵敏度和特产生影响，因此在选择使用ELISA试剂盒时需要根据具体情况进行选择。

酶联吸附法（ELISA）是一种灵敏、特异的学技术，常用于医学、生物领域中的抗原或检测。其作用包括：1.诊断：ELISA可以用于检测或组织样本中的特定分子，如抗原、抗原、标志物等，协助进行诊断。2.检测：ELISA可以用于检测血液中的，如乙型表面、人类缺陷等，用于流行病学调查和临床诊断。3.评估：ELISA可以用于检测后的以及剂量对的化学反应等，帮助对患者进行个性化。4.生物分子检测：ELISA可以用于检测生物分子，如蛋白质、多肽、等，在生物医学研究领域广泛应用。总之，酶联吸附法在医学、生物领域中具有广泛的应用价值，是临床诊断和中重要的辅助手段。

酶联吸附法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一种灵敏、特异的学技术，用于检测抗原或的存在。其基本原理是将抗原或与酶结合，形成酶标抗原或，保留其活性，同时又保留酶的活性。然后将酶标抗原或与固相载体表面结合，形成酶-抗原-复合物通过底物显色反应，根据颜色变化来检测抗原或的存在。ELISA具有高灵敏度、高特、快速、易操作等优点，在医学、生物领域广泛应用。

 操作步骤

1. 工作：将试剂盒从冰箱中取出，室温放置30分钟，使试剂盒恢复至室温。同时好实验所需的材料和。

2. 加样：在酶标板的弟1个孔中加入品50μL，然后在后续的孔中依次加入待测样本50μL。

3. 温育：将酶标板密封，在37℃下温育30分钟。

4. 洗涤：用洗涤液清洗酶标板，共洗涤5次。每次洗涤后，用吸水纸轻轻吸干孔内。

5. 加酶：在每个孔中加入酶标物100μL。

6. 温育：再次将酶标板密封，在37℃下温育30分钟。

7. 洗涤：用洗涤液清洗酶标板，共洗涤5次。每次洗涤后，用吸水纸轻轻吸干孔内。

8. 加底物：在每个孔中加入底物A液50μL，再加入底物B液50μL。

9. 终止反应：在每个孔中加入终止液50μL。

10. 检测：用酶标仪在450nm波长下读取各孔的吸光度（OD值）。

兔细胞角蛋白19(CK-19/KRT19)ELISA试剂盒

结果分析

根据品和样本的OD值，绘制曲线，从而计算出样本中角蛋白1（KRT1）的浓度。具体分析可参剂盒说明书或相关文献。

注意事项

1. 在操作中，应保持酶标板的干燥，避免水分进入孔内。

2. 加样时需确保加样准确、无气泡产生。

3. 温育和洗涤中需严格控制时间和温度，确保实验结果的准确性。

4. 在使用酶标仪读取OD值时，需确保波长设置正确，避免误差产生。

5. 在整个实验中，需保持操作的清洁和整洁，避免交叉污染。