小鼠视网膜色素上皮细胞

小鼠视网膜色素上皮细胞

细胞简介：

细胞名称：小鼠视网膜色素上皮细胞型号

组织来源：眼组织

商品货号：LZ-YX9255

种属来源：小鼠

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

基本属性：

小鼠视网膜色素上皮细胞分离自眼组织；视网膜色素上皮为一层矮六角棱柱状细胞，高8～10μm，宽12～18μm。细胞顶部伸出许多长5～7μm的突起。在胚胎发生时，上皮基部和脉络膜紧密连接，但顶部与视细胞连接不紧，故易在此发生视网膜剥离。电镜观察，细胞之间有紧密连接、中间连接和缝隙连接，基底部有胞膜内褶和线粒体，故推测色素上皮有运输离子和屏障作用。胞核圆形，位于细胞基部。顶部胞质含许多椭圆或圆形的黑色素颗粒和含板层碎片的残余体。滑面内质网发达，分布于色素颗粒和残余体之间。有高尔基复合体、溶酶体、粗面内质网和脂滴。这些结构反映了色素上皮的多种功能：①色素颗粒由粗面内质网产生，经高尔基复合体转运至胞质顶部。已知两栖类和鱼类受强光照射时，色素颗粒移入突起中；处于黑暗时，色素颗粒又回到胞质中，这说明色素上皮有吸收光和保护视细胞免受强光刺激的作用；②脂滴有集聚和贮存A的作用，通过滑面内质网的酯化与转运，参与视细胞合成视紫红质；③能吞噬脱落的视杆细胞外节膜盘，藉溶酶体酶水解消化，形成残余体；④分泌蛋白多糖，粘合和维持视杆、视锥与色素上皮的相互位置关系，从而视紫红质的更新和营养物质的传递。

培养基：ECM基础培养基，FBS，Penicillin，Streptomycin等；

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：不建议传代

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

使用方法：

小鼠视网膜色素上皮细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈上皮细胞样 ，在技术部标准操作流程下，不建议传代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

视网膜色素上皮规格客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶，用75%消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

视网膜色素上皮品牌3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；

3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

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原代细胞试用的实验类型：

上海前面我们了解了原代细胞获取和培养过程中应该注意的一些细节，这有助于我们培养我们的原代细胞。那么原代细胞培养好后，它可适用哪些研究呢？

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个常见的且基础的细胞实验，如下：

一、细胞增殖检测：

常见检测方法：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成

二、细胞周期检测

常见检测方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法

三、细胞凋亡检测

常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL

四、细胞转移能力检测

常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验