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豚鼠解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒

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豚鼠解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒



自从Engvall和Perlman(1971)报道建立酶联吸附试验(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以来,由于ELISA具有快速、、简便、易于化等优点,使其迅速的发展和广泛应用。尽管早期的ELISA由于特不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐,但随着的不断改进、材料的不断更新,尤其是采用基因工程制备包被抗原,采用针对某一抗原表位的单克隆进行ELISA试验,都大大了ELISA的特,加之电脑化程度的ELISA检测仪的使用,使ELISA更为简便实用和化,从而使其成为广泛应用的检测之一。

如今ELISA已被广泛应用于多种和等的诊断。在动物检疫方面,ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的。




ELISA试剂盒的用法包括以下步骤:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml,酶标板中每孔加入50μl,室温、4℃或37℃过夜包被。2.洗涤:弃包被液(拍干,再用无尘纸吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次(每孔均要加满),每次3min~5min。3.封闭:每孔加封闭液(1%BSA)250μl,37℃封闭2h。4.洗涤:用1×PBST洗涤液洗板3次,每次3min~5min。5.加样:加入已经稀释好的样品,37℃反应1h。一般样本加入50-100μl,充分混匀。6.洗涤:用洗涤液洗板3次,每次3min~5min。7.加入酶标试剂:每孔加入100μl酶标溶液,37℃,1h。8.洗涤:用洗涤液洗板3次,每次3min~5min。9.显色:每孔先加入显色剂A液50μl,再加入显色剂B液50μl,37℃避光10-15min。10.终止及测定:加入50μl终止液,终止反应,用酶标仪在450nm波长处测OD值。



酶联吸附法(ELISA)的优点包括:1.高灵敏度:ELISA可以检测出微量的抗原或,其灵敏度通常比其他学更高。2.高特:ELISA仅与特定的抗原或结合,因此不易受到其他的,具有较高的特。3.快速:ELISA操作简便、快速,可以在短时间内结果.4.易操作:ELISA实验操作相对简单,易于化和自动化,因此适合于大规模样品的检测。5.应用范围广:ELISA可以用于检测多种生物分子,如蛋白质、多肽、等,因此在医学、生物领域广泛应用。6.无放射性核素污染:与放射测定法相比,ELISA不需要使用放射性核素,因此更为安全、环保。总之,ELISA是一种高灵敏度、高特、快速、易操作的学技术,具有广泛的应用前景。



酶联吸附法(ELISA)在多个行业都有应用,特别是在医学和生物技术领域中了广泛应用。以下是一些应用ELISA的行业:1.医学诊断:ELISA被广泛应用于各种和等的诊断,如、、结核病等。在动物检疫方面,ELISA已为广泛采用的,例如用于诊断猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪、蓝舌病等。2.生物技术研发:ELISA可以用于检测生物分子,如蛋白质、多肽、等,在生物医学研究领域广泛应用。例如,在研发中,ELISA可以用于检测的生物活性、与靶点的结合情况等。3.食品安全检测:ELISA可以用于检测食品中的有害,如残留、兽药残留等,保障食品安全。4.监测:ELISA可以用于评估水质、空气等指标,监测状况。总之,酶联吸附法在医学、生物技术、食品安全和监测等领域都有广泛的应用价值。



豚鼠解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒



特性

用于标记或抗的酶须具有下列特性:有高度的活性和性;在室温下;反应产物易于显现;能商品化生产。如今应用较多的有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP应用广。

辣根过氧化物酶

过氧化物酶(HRP)广泛分布于植物中,辣根中含,从辣根中提取的称辣根过氧化物酶(HRP),是由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉构成的一种糖蛋白(含糖量18%),分子量约40 000,约由300个酸组成,等电点为pH 3-9,催化反应的适pH值因供氢体不同而稍有差异,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%饱和度以下的铵溶液。酶蛋白和辅基吸收光谱分别为275nm和403nm。

酶的纯度以RZ表示:RZ=OD403/OD275



纯酶的RZ多在3.0以上为3.4。RZ在0.6以下的酶制品为粗酶,非酶蛋白约占 75%,不能用于标记。RZ在2.5以上者方可用于标记。HRP的作用底物为,催化反应时的供氢体有几种:⑴邻苯二胺(OPD),产物为橙色,可溶性,性高吸收值在490nm,可用观察判别,容易被浓终止反应,颜色可在数小时内不改变,是目前国内ELISA中常用的一种;⑵茴香胺(OD),产物为橘吸收值在400nm,颜色较;⑶5-(5-AS):产物为深棕色吸收值在449nm,部分溶解,性较差;⑷邻联甲苯胺(OT)产物为蓝色吸收值在630nm,部分溶解,不,不耐酸,但反应快,颜色明显。



酶联吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种灵敏、特异的学技术,用于检测抗原或的存在。其基本原理是将抗原或与酶结合,形成酶标抗原或,保留其活性,同时又保留酶的活性。然后将酶标抗原或与固相载体表面结合,形成酶-抗原-复合物通过底物显色反应,根据颜色变化来检测抗原或的存在。ELISA具有高灵敏度、高特、快速、易操作等优点,在医学、生物领域广泛应用。



酶联吸附法(ELISA)是一种灵敏、特异的学技术,常用于医学、生物领域中的抗原或检测。其作用包括:1.诊断:ELISA可以用于检测或组织样本中的特定分子,如抗原、抗原、标志物等,协助进行诊断。2.检测:ELISA可以用于检测血液中的,如乙型表面、人类缺陷等,用于流行病学调查和临床诊断。3.评估:ELISA可以用于检测后的以及剂量对的化学反应等,帮助对患者进行个性化。4.生物分子检测:ELISA可以用于检测生物分子,如蛋白质、多肽、等,在生物医学研究领域广泛应用。总之,酶联吸附法在医学、生物领域中具有广泛的应用价值,是临床诊断和中重要的辅助手段。








碱性酶

系从小牛肠和大肠杆菌中提取,由多个同功酶组成。它们的底物种类很多,常用者为盐,廉价性。酶解产物呈,可溶吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反应中,37℃1分钟水解1μg苯二钠为一个单位。



 



 

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