小鼠肝Kuffer细胞

小鼠肝Kuffer细胞

细胞简介：

细胞名称：小鼠肝Kuffer细胞规格

组织来源：正常肝脏组织

商品货号：LZ-YX10158

种属来源：小鼠

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

基本属性：

小鼠枯否细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。枯否氏细胞(Kupffer细胞)是肝脏的肝血窦内一些固定于窦壁的巨噬细胞，它能吞噬和清除大部分从肠道来的抗原微粒，并能吞噬和清除肝血窦中的细菌、异物和衰老的红细胞，并把血红蛋白分解成胆红素。此外，肝巨噬细胞也有处理抗原，诱导T细胞增殖，参与调节的作用。枯否氏细胞和一般巨噬细胞不同，枯否氏细胞不具有增加抗原原性的能力，相反有消除或减弱抗原性的作用。枯否氏细胞能吞噬来自血液循环的抗原抗体复合物和其他有害物质，以消除这些物质对机体的损害。枯否细胞功能障碍可导致肠源性内毒素血症。电镜下有很多皱褶和微绒毛。

培养基：原代巨噬细胞培养体系

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：梭形、巨噬细胞

传代特性：属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

使用方法：

小鼠肝Kuffer细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈梭形、巨噬细胞，在技术部标准操作流程下，属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶，用75%消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

肝Kuffer型号2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

肝Kuffer品牌3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；

3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

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原代细胞试用的实验类型：

上海前面我们了解了原代细胞获取和培养过程中应该注意的一些细节，这有助于我们培养我们的原代细胞。那么原代细胞培养好后，它可适用哪些研究呢？

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个常见的且基础的细胞实验，如下：

一、细胞增殖检测：

常见检测方法：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成

二、细胞周期检测

常见检测方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法

三、细胞凋亡检测

常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL

四、细胞转移能力检测

常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验