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绵羊成纤维细胞生长因子21(FGF21)ELISA试剂盒

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绵羊成纤维细胞生长因子21(FGF21)ELISA试剂盒



影响因素

酶联(ELISA)是如今检验科常用的学检测之一,其操作简单,无须特殊设备,使其在各级医院都有应用。但是,如果忽视了影响其结果的因素,难免会造成假阴性或假阳性,因此,了解影响实验的因素,差错事故的发生是极其必要的。

素质因素

实验室人员的素质主要包括五个方面:思想素质、文化素质、技术素质、心理素质、素质。应具备一个良好的思想素质,因为我们的服务对象是人,我们的道德水平直接关系到人们的健康和生命安危,如果马马虎虎。三心二意,难免会有差错事故发生,我们应该热爱,耐心细致。在工作中如标本混淆、张冠李戴、报告单发错等都有可能造成严重后果;其次文化素质和技术素质,我们要熟练本的基本理论和基本技术,认真学习新理论新知识,努力自己的业务水平,创造一个能够胜任本职工作的技术平台。良好的心理素质就是要勇于面对工作生活中的挫折,在繁忙工作中,有条不紊,冷静沉着的处理有关事务。人员素质问题是影响检验结果的首要因素。

标本处理因素

实验室人员收到标本后应认真查对,对不符合要求的标本和申请单要拘收,合格标本要及时分离,避免溶血,提取时不应混有大量纤维蛋白或细胞成分。对不能及时检测的标本要妥善保存于4℃冰箱,做好原始记录,标本管标上待检者姓名、日期。从冰箱取出的标本要预温至室温,对冰冻的样品要融化好,并充分混匀再用。




酶联吸附法(ELISA)的原理是利用抗原或与酶的结合,形成酶标抗原或,保持其活性,同时又保留酶的活性。将抗原或与酶连接成酶标记抗原或,它既保留了活性,又保留了酶的活性;在测定时,把受检标本(含待测或抗原)和酶标抗原或按一定程序与结合在固相载体表面的抗原或起反应形成固相化抗原-酶复合物,用洗涤的使固相载体上形成的抗原-酶复合物与其它成分分离,结合在固相载体上的酶量与标本中受检的量成一定的比例,加入酶反应的底物后,底物被固相载体上的酶催化生为有色产物,通过定性或定量检测有色产物的量即可确定样品中待测的含量。



ELISA试剂盒的操作步骤如下:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml,酶标板中每孔加入50μl,室温、4℃或37℃过夜包被。2.洗涤:弃包被液(拍干,再用无尘纸吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次(每孔均要加满),每次3min~5min。3.封闭:每孔加封闭液(1%BSA)250μl,37℃封闭2h。4.洗涤:用1×PBST洗涤液洗板3次,每次3min~5min。5.结合一抗:用1×PBST缓冲液1∶1000稀释被检,每孔100μl,要设立阴性对照,37℃孵育1.5h。6.洗涤:同上。7.结合酶标二抗:每孔加1×PBST缓冲液1000倍稀释的酶标二抗羊抗鼠IgG-HRP(稀释倍数根据产品不同有所不同,可按说明书进行)50μl,37℃孵育1h.8.洗涤:同上。9.显色:每孔加底物溶液(TMB)50μl,置室温避光显色10min。10.待显色后,每孔加入50μl终止液(2mol/L H2SO4)终止反应。使用酶标仪读取450nm的OD值,以确定水平。以上步骤仅供参考,具体操作请根据实际情况和产品说明书进行。



ELISA90分钟一步法的优点主要包括:1.操作简单:该只需要一步操作即可完成,操作简单明了,易于。2.快速:ELISA90分钟一步法可以在短时间内完成,适合于大批量样品的快速检测。3.特高:该采用特定的或抗原进行固定和检测,因此具有较高的特。4.灵敏度高:ELISA90分钟一步法具有较高的灵敏度,可以检测出较低浓度的抗原或。5.重复性好:该的重复性,结果较为。6.安全性高:ELISA90分钟一步法不使用放射性同位素等有害,因此具有较高的安全性。需要注意的是,ELISA90分钟一步法也存在一些缺点,例如可能会受到非特因素的影响,结果不准确。此外,该的试剂成本较高,不适合于小规模样品的检测。



酶联吸附法(ELISA)的原理是利用抗原或与酶的结合,形成酶标抗原或,保持其活性,同时又保留酶的活性。将抗原或与酶连接成酶标记抗原或,它既保留了活性,又保留了酶的活性;在测定时,把受检标本(含待测或抗原)和酶标抗原或按一定程序与结合在固相载体表面的抗原或起反应形成固相化抗原-酶复合物,用洗涤的使固相载体上形成的抗原-酶复合物与其它成分分离,结合在固相载体上的酶量与标本中受检的量成一定的比例,加入酶反应的底物后,底物被固相载体上的酶催化生为有色产物,通过定性或定量检测有色产物的量即可确定样品中待测的含量。






绵羊成纤维细胞生长因子21(FGF21)ELISA试剂盒



ELISA的基本类型


根据ELISA所用的固相载体而区分为三大类型:一是采用聚微量板为载体的ELISA,即我们通常所指的ELISA(微量板ELISA);另一类是用纤维膜为载体的ELISA,称为点ELISA(Dot-ELISA);再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA,称为布ELISA(C-ELISA)。在微量板ELISA中,又根据其性质不同分为间接ELISA、双夹心ELISA、双夹心ELISA、竞争ELISA、ELISA及ELISA。


酶联吸附法(ELISA)是一种灵敏、特异的学技术,常用于医学、生物领域中的抗原或检测。其使用范围包括:1.临床诊断:ELISA可以用于检测传染病(如、等)、标志物等,协助进行诊断。2.食品安全:ELISA可以用于检测食品中的有害(如残留、兽药残留等),保障食品安全。3.监测:ELISA可以用于评估水质、空气等指标,监测状况。4.生物分子检测:ELISA可以用于检测生物分子,如蛋白质、多肽、等,在生物医学研究领域广泛应用。总之,酶联吸附法在医学、生物领域中具有广泛的应用价值,是临床诊断和中重要的辅助手段。


ELISA测定结果如何计算.ELISA测定结果计算如下:1.计算阴性对照A值的平均数(NCX )和阳性对照A值的平均数(PCX)。2.两个平均数的差(P-N)大于一个特定的数值,例如0.400,试验才有效。3.3个阴性对照A值均应≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范围,则弃去,而已另两个阴性对照重新计算NCX;如有两个阴性对照A值超出以上范围,则该次实验无效。4.阳性判定值按下式计算:阳性判定值=NCX+0.05。5.标本A值>阳性判定值的为阳性,小于阳性判定值的为阴性。需要注意的是,试剂盒的常数只适合于该特定条件下,而不是对各种试剂均可通用。


 



 

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