肝脂酶(HL)试剂盒微量法说明书
微量法 100管/48样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
商品属性:
产品名称:肝脂酶(HL)试剂盒微量法
货号:LZ-S01186
规格 : 100管/48样
测试方法:微量法
产品分类:脂肪酸代谢系列
发货地:上海
测定意义:
肝酯酶是脂肪分解酶,在肝实质细胞中合成,存在于肝脏窦周间隙内皮细胞表面和窦周间隙腔面的肝细胞微绒毛表面,可促进脂蛋白中的胆固醇向类固醇激素转化,血浆中的HL活性增高时,血浆中小颗粒可导致LDL水平升高,加速动脉粥样硬化的发生。
测定原理:
肝酯酶水解α-乙酸萘酯产生α-萘酚,可与固蓝B盐形成紫红色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与肝酯酶活性成正相关。
自备实验用品及仪器
天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板
试剂的组成和配制:
试剂一:液体 110mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 1mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体 8mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 1mL×1 瓶,4℃避光保存
NAD+和 NADH 的提取:
1 血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 酸性提取液),60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照血清(浆)体积(mL):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 碱性提取液),60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2 组织中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g组织,加入 1mL 酸性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
NADH 的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g
组织,加入 1mL 碱性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
3 细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 酸性提取液),超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 碱性提取液),超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
生化检测试剂盒操作步骤:
一、准备工具和环境:确保操作台面干净、整洁,这是进行科学实验的步。
二、仔细阅读说明书:这是使用试剂盒的基础,说明书包含了所有必要的信息和操作指南。
三、样本采集:按照说明书的指导,正确采集样本。不同类型的检测可能需要不同类型的样本,如血液、唾液或鼻涕等。
四、样本混合:将样本与试剂小心混合,注意轻柔操作,避免产生泡沫,以确保检测的准确性。
五、等待反应:混合后,耐心等待试剂盒的反应,这个时间可以用来进行其他活动,但不要着急,因为好的结果值得等待。
六、结果判读:时间到后,仔细判读结果。试剂盒通常会有明确的指示,告诉你如何根据显示的线条或颜色来判断结果。
公司正在出售的产品:
DYKDDDDK Tag(CT 0.5mgDYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 标签DYKDDDDK Tag分支肽
BMPR1B Protein Human 重组人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 标签)
MBL1重组大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 标签) Protein
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人端粒保护蛋白1(POT1)试剂盒 Human POT1 ELISA kit
RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit大鼠Smad7ELISA试剂盒规格:96T/48T
DNA损伤彗星中性检测完全试剂盒(荧光染色)20次
MousePlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISA试剂盒小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
MBL1重组大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 标签) Protein
DYKDDDDK Tag(CT 0.5mgDYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 标签DYKDDDDK Tag分支肽
GOLM1重组人 GOLM1 / GP73 蛋白 (His 标签) Protein
BMPR1B Protein Human 重组人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 标签)
THSD1 Protein Mouse 重组小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 (His 标签)
肝脂酶(HL)试剂盒微量法小鼠成纤维细胞生长因子7(FGF7)ELISA试剂盒 ,英文名: FGF7 ELISA Kit
人膜攻击复合物(MAC)ELISA检测试剂盒Humanmembraneattackcomplex,MACELISAKit 96T/48T
大鼠流行性乙型脑炎(JE)抗体(IgG)试剂盒 Rat Japanese Encephalitis(JE)Aibody(IgG)ELISA Kit
英文名称RatBonemorphogeneticprotein4ELISAKit大鼠骨成型蛋白质4(BMP-4)规格:96T/48T
酵母细胞染色体分离试剂盒20次
ELISAKitAQP-4人水通道蛋白4规格:48T/96T
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。