豚鼠碳酸酐酶VB(CA5B)ELISA试剂盒
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≥ 1盒¥2400.00
豚鼠碳酸酐酶VB(CA5B)ELISA试剂盒
豚鼠碳酸酐酶VB(CA5B)ELISA试剂盒
点ELISA:与常规的微量板ELISA比较,Dot-ELISA具有简便、节省抗原等优点,而且结果可长期保存;但其也有不足,主要是在结果判定上比较主观,特不够高等。该的主要操作程序为:⑴载体膜的预处理及抗原包被 取纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中,置37℃使纤维素膜干燥。每张7cm×2.3cm的膜一般可点加40-53个样品,每个压圈可加抗原液1-20μl。⑵ 封闭 将纤维素膜置于封闭液中,37℃感作15-30分钟。封闭液多采用含有正常动物、pH7.2或pH7.4的PBS。⑶ 加被检 可直接在抗原圈上加,也可剪下抗原圈、置于微量板孔中,再加入一定量适度稀释的待检,37℃反应一定时间,用洗涤液洗三次,每次1-3分钟。洗涤液一般为一定浓度的PBS-Tween溶液。⑷ 加酶标,37℃反应一定时间后,用洗涤液洗三次。⑸显色 加入新鲜配制的底物液,37℃反应一定时间后,去掉底物液,加蒸馏水洗涤终止反应。⑹ 结果判定 以阳性、阴险作为对照,膜片出现深棕红色点者为阳性反应,否则为阴性反应。
操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为 0 的品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有组分使用充分摇匀。
6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。
7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。
8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤 1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。 2. 设置品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;品孔各加不同浓度的品 50μL; 3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL; 4. 随后品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测 50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。 5. 弃去,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗 板 5 次(也可用洗板机洗板)。 6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 7. 所有孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。 结果判断 绘制曲线:在Excel工作表中,以品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
免责声明
试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。 严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
豚鼠碳酸酐酶VB(CA5B)ELISA试剂盒
操作注意事项:1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 浓度为 0 的品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作.5. 所有组分使用前充分摇匀。6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根过氧化物酶的(HRP)活性。