牛补体片段3c(C3c)ELISA试剂盒重复性好

牛补体片段3c(C3c)ELISA试剂盒 重复性好

90分钟一步法ELISA试剂盒可以适用于、、组织匀浆、细胞上清液等样本类型。这些样本可以用于检测、和其他微生物等病原体，以及、自身性等病理情况。同时，ELISA试剂盒还可以用于检测浓度、维生素等营养，以及污染物等有害的残留量。需要注意的是，不同样本类型和检测项目可能对ELISA试剂盒的灵敏度和特产生影响，因此在选择使用ELISA试剂盒时需要根据具体情况进行选择。

酶联吸附法（ELISA）是一种灵敏、特异的学技术，常用于医学、生物领域中的抗原或检测。其操作步骤如下：1.包被：将抗原或与酶结合，形成酶标抗原或，并固定在固相载体上。2.洗涤：去除未结合的和杂质。3.封闭：加入封闭液，封闭固相载体上未结合的位点，以非特结合。4.洗涤：去除未结合的封闭液和杂质。5.加样：加入待检测的样本，使其与固相载体上的抗原或结合。6.洗涤：去除未结合的样本和杂质。7.加入酶标：使固相载体上的抗原或与酶标结合，将抗原或间接标记上酶。8.洗涤：去除未结合的酶标和杂质。9.显色：加入底物，使酶催化底物生成有色产物，根据颜色反应的程度进行抗原或的定性或定量检测。需要注意的是，具体的操作步骤可能因实验设计、试剂品牌等不同而有所差异。在进行ELISA实验时，应严格按照试剂盒说明书和实验指导手册进行操作，控制好实验条件和操作步骤，以实验结果的准确性和可靠性。

ELISA试剂盒的操作步骤如下：1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml，酶标板中每孔加入50μl，室温、4℃或37℃过夜包被。2.洗涤：弃包被液（拍干，再用无尘纸吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次（每孔均要加满），每次3min~5min。3.封闭：每孔加封闭液（1%BSA）250μl，37℃封闭2h。4.洗涤：用1×PBST洗涤液洗板3次，每次3min~5min。5.结合一抗：用1×PBST缓冲液1∶1000稀释被检，每孔100μl，要设立阴性对照，37℃孵育1.5h。6.洗涤：同上。7.结合酶标二抗：每孔加1×PBST缓冲液1000倍稀释的酶标二抗羊抗鼠IgG-HRP（稀释倍数根据产品不同有所不同，可按说明书进行）50μl，37℃孵育1h.8.洗涤：同上。9.显色：每孔加底物溶液（TMB）50μl，置室温避光显色10min。10.待显色后，每孔加入50μl终止液（2mol/L H2SO4）终止反应。使用酶标仪读取450nm的OD值，以确定水平。以上步骤仅供参考，具体操作请根据实际情况和产品说明书进行。

双夹心

本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病（IBDV）的双夹心ELISA为例介绍本法的操作程序。

① 加包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干

② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干

③ 加酶标 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干

④ 加底物液　→ 37℃ 15分钟，加终止液

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。

双夹心ELISA

此法与双夹心ELISA的主要区别在于：它是采用酶标抗检查多种大分子抗原，它不仅不必标记每一种，还可试验的性。此法的基本程序为：

① 加（Ab-1）包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干

② 加待检抗原（Ag） → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干

③ 加用非同种动物生产的特（Ab-2)→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干

④ 加入酶标抗Ab-2（AB-3）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干

⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液

⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。

竞争ELISA

此法主要用于测定小分子抗原及半抗原，其原理类似于放射测定。其基本程序为：

① 包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干

② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原（对照孔仅加酶标抗原）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干

③ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液

④ 用ELISA检测仪测定OD值。

 

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