大鼠滑膜间充质干细胞

大鼠滑膜间充质干细胞

基本属性：

细胞名称：大鼠滑膜间充质干细胞 

组织来源：关节组织

商品货号：LZ-YX10058

种属来源：大鼠

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

滑膜是关节囊的内层 ，淡红色 ，平滑闪光 ，薄而柔润 ，  由疏松结缔组织组成。关 节腔内的所有结构 ，除关节软骨、半月软骨板以外,即便是通过关节腔的肌腱、韧 带等均全部为滑膜所包裹。关节软骨一旦损伤将很难修复 ，运用自体软骨细胞移植技术治疗软骨损伤 ，效果 较好 ，但由于细胞来源不足以及取材造成的取材部位发生病变等因素 ，使其应用 受到限制。间充质干细胞  ( MSCs)  具有高度增殖和多向分化潜能的特性。其中 ，滑膜中间充 质干细胞的比例较高 ，少量的标本就可获得足量的滑膜MSCs。此外 ，  由于其具有 比骨髓、脂肪等来源的MSCs更好的成软骨、成骨、成脂肪等多分化能力和更强的 集落形成能力等吸引了许多研究者对其进行深入研究。

培养基：原代成纤维细胞培养体系

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维样细胞

传代特性：根据细胞特性

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

使用方法：

大鼠滑膜间充质干细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈成纤维样细胞，在技术部标准操作流程下，根据细胞特性，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶，用75%消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

大鼠滑膜间充质干型号3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

大鼠滑膜间充质干品牌3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；

3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

原代细胞试用的实验类型：

上海前面我们了解了原代细胞获取和培养过程中应该注意的一些细节，这有助于我们培养我们的原代细胞。那么原代细胞培养好后，它可适用哪些研究呢？

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个常见的且基础的细胞实验，如下：

一、细胞增殖检测：

常见检测方法：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成

二、细胞周期检测

常见检测方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法

三、细胞凋亡检测

常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL

四、细胞转移能力检测

常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验

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