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人脉络膜微血管内皮细胞

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人脉络膜微血管内皮细胞

基本属性:

细胞名称:人脉络膜微血管内皮细胞规格

组织来源:眼组织

商品货号:LZ-YX9931

种属来源:

产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介:

脉络膜新生血管(choroidal neovascularization ,CNV)已成为眼科学领域的研究 热点之一,  目前多数体外研究应用的是人脐静脉内皮细胞或主动脉内皮细胞等容 易得到的大血管内皮细胞。由于血管内皮细胞具有器官特异性和组织特异性,用  大血管内皮细胞的研究结果很难客观、准确地解释CNV的发生机制。因此,  建立 脉络膜微血管内皮细胞(choroidal microvascular endothelial cells ,CEC)体外  培养体系,  对深入研究CNV相关疾病具有十分重要的价值。

培养基:原代内皮细胞培养体系

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁培养

细胞形态:呈鹅卵石样,不规则细胞

传代特性:细胞特性确定传代

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%

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使用方法:

人脉络膜微血管内皮细胞是一种贴壁培养细胞,细胞形态呈呈鹅卵石样,不规则细胞,在技术部标准操作流程下,细胞特性确定传代,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

脉络膜微血管内皮规格1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;

3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

脉络膜微血管内皮品牌3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;

3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

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原代细胞试用的实验类型:

上海前面我们了解了原代细胞获取和培养过程中应该注意的一些细节,这有助于我们培养我们的原代细胞。那么原代细胞培养好后,它可适用哪些研究呢?

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个常见的且基础的细胞实验,如下:

一、细胞增殖检测:

常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成

二、细胞周期检测

常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法

三、细胞凋亡检测

常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL

四、细胞转移能力检测

常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

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