小鼠组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)ELISA试剂盒
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T: ELISA 试剂盒(96 孔规格)一般可以进行多少个样本的检测?
答: 标准品孔和待测样本孔需进行复孔操作以数据的可信度。每次需将标准品按照7-8个梯度稀释以制备准确的标准曲线。一次96孔板实验可以进行20-25个样本的检测工作。
T: ELISA 的检测数据如何进行处理?
答: 1)将得到的各个复孔浓度的吸光度值计算平均值
2)按照横坐标为梯度稀释的标准品浓度,纵坐标为吸光度值做散点图,添加趋势线
3)利用多项式回归 分析计算由以上数据产生的公式与 R2 值(R2 值越接近1说明线性关系越好)
4)根据公式及待测样本的平均吸光度值计算样本中目的蛋白的浓度
T: 如何准备需要进行ELISA检测的细胞样本?
答: 检测细胞分泌性成份时:用无菌管收集细胞培养上清,离心20分钟(2000-3000转/ 分)
取上清检测。检测细胞内成份时:收集细胞,用PBS(pH7.2-7.4)稀释细胞浓度至 106/m左右,通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟(2000-3000 转 / 分),收集上清。保存过程中如有沉淀形成,需再次离心。
小鼠组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)ELISA试剂盒
精密度详情:
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,
分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差:CV<10%
批间差:CV<12%
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,
每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
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