牛微纤丝相关蛋白4(MFAP4)ELISA试剂盒
试剂盒是固相夹心法酶联吸附实验(ELISA).已知浓度的品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
产品特点
一、、灵敏、特异的;
二、的重复性和可靠性;
四、适用、、组织匀浆液、细胞上清液、等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
制备:
包括以下步骤:
(2)抗原的制备;
(3)的采集;
(4)间接ELISA的建立;
(6)试剂盒的性验证;
(7)对屠宰场进行临床检测。该简单、快速、灵敏度高、特强、性合格、重复性好。应用本发明制得的试剂盒能有效检出感染猪的戊型,适用于大批量发病样本的检测,可用于猪戊肝的快速诊断,并预防、控制流行和由猪向人传播。
ELISA的基础是抗原或的固相化及抗原或的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或仍保持其学活性,酶标记的抗原或既保留其学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的或抗原)与固相载体表面的抗原或起反应。用洗涤的使固相载体上形成的抗原复合物与中的其他分开。再加入酶标记的抗原或,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了反应的结果,使测定达到很高的度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定。
ELISA法是诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、病及非传染病等方面的诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于流行病学调查。本法不仅可以用来测定,而且也可用于测定中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,
ELISA实验通用规则
1、要移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。有人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的后,要更换枪头。即使是吸取品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更。
4、实验时,要使底物避光保存。
5、用枪吸取时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取时,要用量程和需要量接近的枪去吸,误差。
7、将加到酶标孔中时,避免枪头和孔内,可使枪头上的液滴和孔壁,液滴会自然流下去。
8、全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀。也可以用酶标仪的晃动功能。
9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去后,要将酶标板在报纸或毛纸上拍干。
11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
12、底物是光的,要在临用前现配。
13、检测前,要打开酶标仪,使之10分钟以上。
14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免。
15、待检样品要澄清,否则会影响结果。
16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
17、应尽量做双孔实验,这样才能数据的准确性。
18、对结果有疑问的样品要用其它进行确证。
ELISA的基础是抗原或的固相化及抗原或的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或仍保持其学活性,酶标记的抗原或既保留其学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的或抗原)与固相载体表面的抗原或起反应。用洗涤的使固相载体上形成的抗原复合物与中的其他分开。再加入酶标记的抗原或,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了反应的结果,使测定达到很高的度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定。