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安全措施
1.安全管理措施
在作业指导书中编制详细的安全防护措施,在施工设计图中明确安全设施的布设,严格控制和防止各类伤亡事故。具体措施如下:
a、进行全面的、针对性的安全技术交底。安全教育要经常化、制度化。提高施工人员的安全意识,切实树立“安全”的思想,建立完善的安全工作体系。
b、严格安全监督,建立和完善定期安全检查制度。施工现场严格按照“安全标准工地”的要求执行。
c、抓好现场管理,保障人身、机械和器材的安全。施工危险地段要设置安全警示牌,以防意外事故发生。
d、责任落实到人,清除不安全因素。定期或根据施工需要发放和检查施工所用的各种安全机具设备和劳动保护用品。
2.安全注意事项
a、在施工过程中认真执行安全生产的三大规程和有关安全生产的各项法规,严格控制和防止各类伤亡事故。
b、在施工过程中要抓好现场管理,坚持文明施工,保障人身、机械和器材的安全,并认真作好防火工作及注意用电安全。严格按有关规定安装线路及设备,用电设备都要安装地线,不合格的电气器材严禁使用。对各项施工责任落实到人,实行定岗定责,确保施工安全。
c、禁止双层作业,吊重作业时,吊臂下严禁站人。
d、大雾及6级以上大风天气禁止高空作业。
e、夜间施工应由足够的照明。
f、主要机具、电器、运输设备等,应定机定人,严格执行交接班制度。接班时,对机具检查一次,并做好记录。

(1)进入现场后,对施工现场进行布置并张挂施工标语、彩旗进行美化。严禁一切非施工人员进入现场。
(2)对进场人员要进行文明施工教育,使施工人员都能遵守劳动纪律,搞好与当地群众的关系,不做损害人民群众利益的事。
(3)把工作噪音大、有振动的施工机械设置在远离居民区住宅,尽量减少施工噪音对附近居民的干扰。充分利用白天作业时间,尽量减少夜间噪音。工作时间严格遵守早6点到晚10点。
(4)严格控制施工过程的扬灰,倒运车辆用苫布遮盖,既防止扰民也避免了环境污染。
(5)场内、外施工用道路日扫日清,生活垃圾和建筑垃圾及时清理。雨天施工进场车辆出入时,设专人清理车轮,防止污染路面。
(6)遇有地下管线及其他地下设施,采用人工施工保持原状,如需要挪移的与建设单位、监理单位共同协商解决。
(7)工完场清:在施工过程中,要求各作业班组做到工完场清,以施工现场没有多余的材料、垃圾。作为项目经理部应派专人对施工现场进行清扫、检查,以使每个已施工完的结构清洁、无太多的积灰,而对运入现场的材料要求堆放整齐,以使整个施工现场整齐划一。
(8)对于工程中所使用的氧气、乙炔等有专人保管,未经同意,不得任意使用;本工程所用材料均为绿色环保材料,使用后对周围环境、水源、空气等均不产生任何污染。
(9)施工平面图规划合理,应具有科学性、方便性,有利于施工平面布置。

工地危险地方要设置安全警示牌,各种机具搭设防护棚。
加强劳动保护和安全防护工作,备齐用好安全防护用品和劳动保护设施,使施工人员和设备材料确有安全保障。不戴安全帽、不穿工作服的人员不得进场作业。
现场用火须经有关部门批准。使用电气焊时设专人看火。现场准备消防器材。
现场要有消防灭火系统。并设有“严禁烟火”的警告标志,避免一切火灾发生,确保工程顺利进行。
加强现场平面管理,保持施工现场清洁整齐,搞好文明施工。
作业人员饮食、饮水安全。

实验手段、关键技术等说明);
【研究方案】
分为预初实验和正式实验两个阶段
阶段:预初实验阶段
1、体内实验
动物分组:
:用百草枯造模,根据补阳还五汤给药剂量的不同将90只大鼠随即分为三组,每组30只。三种药物剂量分别为:0.4mg/kg、0.6mg/kg和0.8mg/kg,造模当日开始给药直至处死。然后:每组再根据观察持续时间的不同分为三个亚组,每组10只。分别观察至28、56和112天。
观察指标:
1)动物存活率
2)动物血标本:检测各组动物血常规、肝、肾功能变化
3)动物肺组织病理标本:HE染色,光镜下观察组织结构、细胞形态等变化,以评价药物对肺组织的影响。
2、体外实验:
取动物肺组织,分离和培养肺泡巨噬细胞和成纤维细胞,采用 HE 染色法观察肺组织肺泡炎程度,RT-PCR技术观察肺组织病理及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA,Smad3mRNA 的表达。观察不同浓度的补阳还五汤对肺组织的影响差异,同时观察补阳还五汤的体外细胞毒性作用。
3、分析决策:
综合分析体内、体外研究结果,选择动物存活率高,肺组织病理变化轻,毒性反应轻的剂量为佳给药剂量。

【技术关键】
实验部分的技术关键:
体内实验:
1、百草枯致肺纤维化动物模型的成功建立:国内外已有十分成熟的方法。成功的关键在于给药方法和药物在肺内的均匀分布。目前常用的方法有气管插管注入、雾化吸入、气管穿刺注入和动脉灌注等方法。根据前期实验的经验,气管插管注入法简单、方便、对动物损伤小,只要操作熟练,可确保药物准确到位。注药后立即将动物体位旋转,可使药物分布均匀。
2、本研究需要观察动物的存活时间较长,对饲养环境要求较高,同济大学医学院可以提供符合要求的实验场所
3、补阳还五汤对动物重要脏器功能的影响需要进行肝、肾功能等检测。用正常大鼠建立正常值范围。
体外实验:
1. 肺内各种细胞的培养技术基本成熟,我院已具备符合要求的细胞培养条件
2. 补阳还五汤对体外培养细胞毒性的检测方法基本具备

关于细胞凋亡的检测:主要问题是细胞凋亡判断标准和定量分析。前述任何一个指标单使用,均不能准确的反映细胞凋亡的真实情况,将几种方法结合运用则可相互取长补短,较为的定性、定量。因此,本研究采取多种方法联合应用,从不同角度证明细胞凋亡事件是否发生、发生的时期和严重程度。如:(1)检测细胞水平和亚细胞水平的形态学变化:用光镜可观察到细胞变小,胞质浓缩,核染色质浓缩并边缘化,核片段形成和凋亡小体形成;用电镜可观察超微结构的变化,如胞膜微绒毛变少和消失等。(2)根据生化指标变化:如 DNA 片段化的形成,应用原位缺口翻译技术(TUNEL)进行定性和定量检测。在定量分析时,DNA断裂点形成是目前常用的判断标准,TUNEL是凋亡检测,特别是定量分析中主要的方法。(3)利用分子生物学指标:主要指凋亡相关基因及其表达产物的检测。本研究选择多个促凋亡基因和抗凋亡基因同时检测,提高准确性;选择反映不同凋亡时期的新检测指标,更地帮助判断凋亡事件发生的早晚。(4)利用流式细胞术:流式细胞术是研究程序性细胞死亡时细胞许多特性的一种重要的定性、定量分析技术。当细胞凋亡时,细胞膜的通透性增加,小分子 DNA片段丢失,用 DNA特异性荧光染料进行染色后,凋亡细胞的染色程度下降,通过流式细胞仪进行 DNA 含量的检测,可以鉴定出凋亡的细胞。利用流式细胞术结合新的研究方法,还可分辨出早期凋亡和晚期凋亡的细胞,如进行 BALF中凋亡细胞磷脂酰丝氨酸外翻分析和凋亡细胞线粒体膜势能的检测等。技术关键在于:需保持检测标本呈单细胞悬液状态,不至于凝聚成团;活细胞与死细胞的鉴别以及早期凋亡和晚期凋亡细胞的鉴别,都需要不同的检测方法和

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