北京633nm相机补光激光器厂家
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多维流式细胞术的发展新趋势——激光器的选择、优化和集成
持续的病毒大流行进一步加速了个性化医疗的趋势,这一定程度上推动了用于研究和临床应用的更的流式细胞仪的发展。具体来说,所谓的多维流式细胞术需要引入更多激光波长来提供更大的数据集,以便在单个仪器中测量更多的细胞类型。
然而,这对于激光器厂商们则是一个挑战,他们不仅需要提供紫外线、可见光和近红外(near-IR)范围内的新波长可供选择,也需要对诸多单一波长的激光器进行整合和优化——多波长激光模块,以便于简化仪器制造商的后续生产和开发。
流式细胞术基础知识
流式细胞仪是一种可以计算血液样本中各种细胞类型数量的仪器。为了实现这一点,血液样本被浓缩,然后用多种荧光染料的混合物处理。每种荧光染料都能够和细胞表面的特定靶蛋白相结合,通过处理后的细胞会被放入流式细胞仪,通过一个喷嘴装置,使细胞被排成一列移动。
当细胞被输送到激光作用区后,一束或多束不同颜色的激光会聚焦在细胞上,每种荧光染料会在不同的波长被激发,产生与之对应的荧光和散射,仪器则会通过这种方式来识别各种细胞。
光学器件会收集荧光信号并使用带通滤波器将其分离到波长箱中,并使用检测器(光电倍增管或雪崩光电二极管)来定量测量光信号。
常规的流式细胞仪通常会含有多达四个激光波长和十个个检测器。新的仪器则会包含多达9个激光波长以及60个检测器。 两种仪器的效率都很高,通常每秒能够分析数百个细胞。
流式细胞仪简易原理
多维细胞术的挑战
荧光信号的波长总是比激光激发的波长要长(斯托克斯位移)。这种偏移允许使用带通滤波器和截止滤波器的组合有效地将荧光与散射激光分离。理轮上我们可以通过在激发曲线的峰值位置处去激发荧光染料,以此来达到大的信噪比。在多维流式细胞术的应用中,试剂组通常由多种荧光染料组成,这些荧光染料经过精心挑选,以确保它们都具有不同的激发和荧光光谱。这对于使仪器能够分离信号并由此确定每个细胞附着多少荧光染料至关重要,这反过来又使仪器能够明确的确定它是什么类型的细胞。
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