PCR检测试剂盒有效期一般为1年,这是指在适当的储存温度下。核酸扩增部分的试剂一般要贮存于-20℃下,产物检测部分试剂则贮存于2-8℃。尽量避免反复冻融。上海
产品名称:诃子探针法PCR鉴定试剂盒
英文名称:Fructus chebulae
产品货号:LZ-P2707
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38;
2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性;
3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3)诃子探针法PCR 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR检测步骤:
1、诃子探针法试剂盒样品处理
1)按照GB 4789.10-2016(或SN/T 1870-2016),取样品25g(mL),加入到含有225mL 7.5% NaCl肉汤的无菌容器中均质,调节pH至6.8±0.2。
2)36±1℃培养18-24h。
注:也可参考其他地方标准进行样品的前处理。
2、核酸提取
1)取40μL增菌液于裂解液管中,98℃或沸水浴10min。
2)冷却至室温,吸取上清备用或者置于-20℃保存。
3、反应体系配置
从试剂盒中取出SA预混液,充分融化,短暂离心,然后将阴性对照、样品的DNA提取液、阳性对照各取5μL分别加入PCR管中,盖好管盖,短暂离心,立即进行PCR扩增反应。
4、PCR扩增
PCR管置于PCR仪上,推荐反应程序设定如下:反应体系为25μL,在第二步每个循环60℃时检测荧光信号,检测通道选择FAM。
公司正在出售的产品:
小鼠α1干扰素(IFN-α1)PCR检测试剂盒 , IFN-α1 ELISA Kit
大鼠Ⅲ型前胶原基端肽(PⅢ)ELISA检测试剂盒RatprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit
人I 型胶原蛋白(COL I)试剂盒 Human Collagen Type I,COL I ELISA Kit
英文名称MouseFGF9ELISAKit小鼠碱性成纤维细胞生长因子9FGF9
冰冻切片半胱酸蛋白酶-4(CASPASE-4)活性原位荧光染色检测试剂盒50次
Rat6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aPCR检测试剂盒大鼠6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)PCR检测试剂盒
人克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA
小鼠凝血因子Ⅺ(FⅪ)试剂盒 Mouse coagulation factor Ⅺ,FⅪ ELISA Kit
血管生长因子(TAF)PCR检测试剂盒 , TAF ELISA Kit
Humanypsinogen-2,y-ⅡPCR检测试剂盒人胰蛋白酶原Ⅱ(y-Ⅱ)PCR检测试剂盒
ELISAKitP-PKC小鼠0酸化蛋白激酶C规格:48T/96T
Humanai-Mi2-aibodyELISAKit人抗Mi2抗体(ai-Mi2-Ab)PCR检测试剂盒
诃子探针法PCR鉴定试剂盒DBH(Human dopamine- Beta-hydroxylase) ELISA Kit 人多巴胺-β羟化酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-NFKB p65 (Ser276) 0酸化细胞核因子NF-κB p65抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-18R alpha/CD218a 白细胞介素-18受体α链抗体 规格 0.2ml
LR/Ob-R ELISA Kit 大鼠苗条素受体 96T
Phospho-PDPK1(Tyr9) 英文名称: 0酸化30酸依赖性蛋白激酶1抗体 0.1ml
CDX2 英文名称: 尾型同源盒转录因子2抗体 0.1ml
Anti-Phospho-NFKB p65 (Ser276) 0酸化细胞核因子NF-κB p65抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml