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九星碱性蛋白酶

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碱性蛋白酶的主要来源为微生物提取,研究和应用较多的主要是芽孢杆菌,以枯草杆菌为,也有少量其他菌种,比如链霉菌。
天然菌种的生产能力和所含的酶活性、稳定性往往达不到工业生产的需求,需要对菌种进行筛选改进,常用的方法有诱变、基因工程、蛋白质工程、孢子热处理等。主要目标是提高酶的活性、稳定性(耐温耐碱)、抗氧化、抗螯合性能。

主要应用领域:洗涤剂、制革、丝绸、饲料、医药、食品、环保等 [2]
其应用主要围绕其水解蛋白质肽键的功能展开,生产生活中,有几个主要的需求:1 使复杂的大分子蛋白质结构变成简单的小分子肽链或者氨基酸,从而变得易于吸收或洗去,比如食品、洗涤剂、饲料等领域。2 部分破坏蛋白质结构,使物质组分之间实现分离,这在皮革、丝绸等含蛋白质丰富的材料加工时十分有效,3 促进环境污染物降解,用于环保领域 4 蛋白酶既能催化水解反应,也能催化其逆反应,而且具备高度的活性和专一性,非常适合医药工业对某些特定分子的生产需求。

胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH 为 8.0 、温度为 37℃ 时,胰酶溶液的作用能力强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: D-Hanks 液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用

1. 称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为 0.25 %,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调 PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。搅拌混匀,置于 4℃ 内过夜。
2. 用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器( 0.22 微米微孔滤膜)抽滤除菌。然后分装成小瓶于 -20℃ 保存以备使用。
胰蛋白酶能够催化蛋白质的特定肽键水解,这个催化过程是不需要能量的,不会使酶失去活力,也不会改变形状和使自身水解。底物与酶的活性中心的结合是可逆的,这种结合使得蛋白质特定肽键因弯曲变形而被活化,更易于受到水分子的攻击,分别形成氨基和羧基而断裂,得到小分子多肽或氨基酸。不同的蛋白酶可以作用在不同氨基酸相连组成的肽键,因此胰蛋白酶并不能作用在所有的肽键。
酸性蛋白酶是指蛋白酶具有较低的适pH,而不是指酸性基团存在于酶的活性部位,酸性蛋白酶的适PH从2左右(胃蛋白酶)到4左右。从酶的活力-PH曲线分析,在酶的活性部位中含有一个或更多的羧基。这一类蛋白酶中研究的是胃蛋白酶。

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