快速解决PCR实验室核酸污染的适用方案

近日，guowuyuan发布：全国所有二级综合医院都要具备核酸采样和检测能力的通知，要求在2020年9月底前，三级综合医院、传染病zhuanke医院、各级疾控机构以及县域内至少1家县级医院具备核酸采样和检测能力。到2020年底前，所有二级综合医院具备核酸采样和检测能力。

核酸检测技术在我国得到逐步的推广和应用，并已成为血液筛选查实实验室的重要实验手段，但因其灵敏度高的特点，同时实验室也容易导致污染，特别是核酸的气溶胶污染比较严重。如何预防和处理PCR核酸实验室污染为本文讨论的。

关键词：分子诊断，核酸检测，核酸污染，DNA，RNA，PCR，DNA测序，原位杂交，SNP，基因芯片，假阳性

核酸污染是困扰绝大多实验室的一个难题。微量的核酸污染会产生假阳性的检测结果，这样会对病人造成误诊，耽误病情。如任由此情况发展，会形成气溶胶污染而扩散，终导致整个实验室的污染，严重的会关闭实验室，如无备用实验室，会造成更大的损失。是否有一种快速的解决方案呢？且看下面。

分子诊断是指利用分子生物学方法来检测样品中遗传物质的结构或表达水平的变化从而做出相应诊断的技术。由于分子生物技术的发展，人们生活水平不断提高记忆对健康问题更为重视，分子诊断得以迅猛发展，市场份额快速提高。我国分子诊断产业虽然起步较晚，但现已与欧美，日本，新加坡等起步较早的国家之间的的差距也越来越小。

而由于日常检测中要处理大量的不同来源的核酸以及核酸本身难以降解的特性，核酸污染是困扰绝大多实验室的一个难题。微量的核酸污染会产生假阳性的检测结果，这样会对病人造成误诊，耽误病情。如任由此情况发展，会形成气溶胶污染而扩散，终导致整个实验室的污染，严重的会关闭实验室，如无备用实验室，会造成更大的损失。

在与核酸污染长期抗争中，人们也总结出了一些预防和清除核酸污染的方法。对于预防，实验人员一定要不断改进并严格遵循实验室操作流程，对实验室不同操作进行区域划分，分装试剂，定期对实验仪器进行灭菌，实验室适当通风，养成实验中进行阴阳对照的好习惯。

当污染已经出现，传统的清除方法包括对可疑器用稀酸进行擦拭或浸泡，紫外线照射，对反应液用DNaseⅠ或内切酶进行处理等方法。这些方法对一些微量污染会有一定效果，但对污染效果不是很理想，而且紫外线照射会对人体造成一定的危害。

污染传统处理方法：

准备（1：50）、（1：10）消毒液，75%无水酒精。
2.5.1把STAR上的所有载架都拿出来，用1：50的消毒液进行擦拭，待作用五分钟后用清水冲洗。

2.5.2 SATR内部用喷壶喷洒75%无水酒精，底部金属部分可用1：50的消毒液进行擦拭，待酒精完全沉降后，用清水擦拭。

2.5.3实验室内工作台用1：10的消毒液进行擦拭，实验室内部用喷壶喷洒1：50的消毒液，等待空气中的消毒液沉降后，用1：50的消毒液拖地，建议当天不用清水擦拭或拖地，待第二天早上来再用清水擦拭拖地。

2.5.4实验室用的耗材（除用自封袋封好的），能灭菌的，均用备用灭菌锅进行一次灭菌。

2.5.5机器通道污染的处理，将配置好的消毒液（1：50）代替裂解液，加入裂解液槽里，完成加裂解液的过程，在机器每次吸取一定量的消毒液后，暂停十分钟，让消毒液挥发到通道内部，反复四次即可，这个过程中用的枪尖同样不带滤芯。后将裂解液槽里的消毒液（1:50）用水洗净后换上蒸馏水重复以上程序。（此类方法正常情况下不建议使用，只有在污染去除不了时才慎重使用。用该方法处理过机器后，当天不再做核酸实验）。

总之，对于核酸污染大家一定要给予足够的重视，提前预防，不要等到污染已经出现才想办法清除，经常在实验室中配备清除污染的试剂，发现污染可马上进行处理，相信这样核酸污染将不再是让众多实验人员头疼的问题。

注：实验室的污染不可能一次就清理干净，需反复清理验证，直到实验结果能被采用为止。

核酸实验室污染的主要原因有：

1）标本污染；2）试剂污染；3）产物污染；4）其他污染。

其解决措施为：其解决措施为：

1）标本污染，重新采样进行检测，评估标本前处理环节；
2）试剂污染，更换新的试剂重新检测评估；
3）设备污染，设备整体消毒清洁、维护；
4）产物污染，全面清洁消毒实验室、仪器设备所有实验有关用品。一旦发生污染后，围绕实验室寻找污染源分析污染原因耗时且很繁琐，所以防止污染重在预防。

因核酸实验室污染后极其难以清除，有可能造成实验室不能使用的风险。但是如果一旦出现核酸实验室污染，除了上面常规的消毒清洁方法之外，另外还有一种比较好使而且快速全面的实验室空间灭菌方法。根据国外DNA研究所大量实践证明空间熏蒸消毒确实有效去除核酸污染源，时间短、、安全、节省劳动力等等优点。此空间熏蒸消毒方法为法国H2O2干雾消毒技术，整体核酸实验室覆盖，无死角，快速分解掉核酸污染源，消毒完后，随着排风即可清除而无残留，省时省力。特别适用核酸实验室气溶胶污染。

在众多的H2O2消毒技术当中，据大数据得知，法国的H2O2干雾消毒技术（技术支持：①⑧⑨⓪②⑧④②③⑦⑨）由oxypharm制造的消毒机力压群雄，成为行业消毒去除PCR实验室核酸污染的。（并且持久）
法国欧菲姆H2O2干雾消毒方案的精妙之处在于的解决方案，巧妙利用了特别的干雾设备+H2O2杀孢子剂（高纯低浓度）的配合，组成无懈可击空间消毒方案，避免了H2O2蒸汽的腐蚀性和解决了扩散性问题。

OXY-30000 H2O2消毒器采用到而特殊的结构设计，使得在仅仅输入电能的情况下，集压缩、ventur喷射和雾滴内外部溅射碎化功能于一体，使液态杀孢子剂变成气雾状态极微小颗粒喷出，高速极小微粒与空气接触后充分气化，变成气态H2O2即为“干雾”。此干雾具备良好的扩散性和细菌杀灭效果。

OXY-30000干雾消毒器的特点为：

1、灭菌效果好，生物指示剂挑战降低6lg对数值，能杀灭环境中的MRSA、VRE、结核分枝杆菌、芽孢、病毒和多重耐药的革兰阴性菌（鲍曼不动杆菌）；

2、活性氢氧基团能分解DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物质；

3 快速空间灭菌，比起喷雾或熏蒸所需要的时间更短，实现更快速的密闭空间灭菌措施，预防核酸实验室环境空气污染及核酸片气溶胶污染，及快速去除实验室核酸污染源；

3、小于3微米干雾气体，扩散性，能扩散到每一个角落，空气中做布朗运动，消毒干雾无孔不入，对付小分子核酸污染源物质；

4、消毒干雾相对一般H2O2稳定，自然损耗小，维持的灭菌浓度均匀，基本不受温度、环境湿度的影响（真正的干雾才能做到这点）；

5、无色，无残留，安全可靠，当天使用消毒清除污染，当天即可使用实验室，换回损失。

润联环保致力于核酸实验室污染预防与处理多年，引进国外相关的处理经验，结合国内PCR实验室实际情况，制定了的核酸污染解决方案。法国欧菲姆H2O2干雾气体空间消毒去除核酸气溶胶污染的效果有待您亲眼见证，免费现场效果测试。</a>