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细胞冻存液

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细胞冻存液

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产品名称:细胞冻存液

货号:LZ-PYJ5145

英文名称:liquid cryopreservation medium

产品规格:50ml

本产品是一种即用型的培养细胞低温冻存液,适用于绝大部分的哺乳动物原代细胞、传代细胞系和杂交瘤细胞等的冻存保种。

细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,利用冻存技术将细胞用冻存液重悬后置于196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,这样可以大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用DMSO作保护剂,能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少细胞损伤。


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配制过程中的常见问题分析:

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01 培养基颜色不正确

(1)含有酸碱指示剂的培养基,若颜色不正确,通常是由于pH不正确导致的,加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。

(2)加热过度导致某些成分分解或糖焦化,如SC培养基(SC增菌液)加热过度会变红,含糖量高的培养基,加热过度通常会出现颜色加深,呈焦糖色或棕褐色。

(3)某些成分变质,如血液久置易变黑,制成的平板颜色偏棕黑色。

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02 培养基不凝固或凝固性差

(1)颗粒培养基称量错误

(2)琼脂分布不均匀

(3)培养基pH不正确

(4)培养基加热过度

(5)琼脂量不足

03 培养基产生沉淀

(1)某些培养基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培养基等,配方中含有大量不溶性碳酸钙。

(2)灭菌前未充分溶解,若灭菌前溶解不充足,灭菌后就会出现大量沉淀。

(3)pH不正确,偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。

(4)水的纯度不够,天然水中含有较多的矿物盐离子,若未除净,则易与培养基中反应生成沉淀。

(5)添加剂加入温度不正确,卵黄、血液等对温度敏感的添加成分,若加入时温度过高或温差过大,易出现凝块。

(6)称量错误。

(7)试剂加入顺序不正确。

注意事项:

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1)培养基尽量使用新鲜培养基,2~4h内用完;

2)上海应使用预还原培养基,预还原24~48h更好;

3)可采用预还原灭菌法制作的培养基(用前于培养基中加入还原剂,如L-半胱氨酸、维生素C等,尽可能使预还原剂处于还原状态);

4)液体培养基应煮沸10min,以驱除溶解氧,并迅速冷却,立即接种医。学教育网搜集整理;

5)厌氧菌的培养基均应营养丰富,并加有还原剂与生长刺激因子(血清、维生素K、氯化血红素、聚山梨酯-80等)。

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