革兰氏染色液培养基
货号:LZ-PYJ3661
英文名称:Gram Staining
产品规格:5mL*8
用途:用于细菌革兰氏染色试验
1.涂片经火焰固定,加(结晶紫溶液)溶液A染1分钟,用清水冲去染液。
2.加(液)溶液B染1分钟,水洗。
3.加(脱色液)溶液C,不时摇动玻片约10-30秒,至无紫色脱落为止,水洗。
4.加溶液D,染1分钟,水洗。
5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色。
配制过程中的常见问题分析:
01 培养基颜色不正确
(1)含有酸碱指示剂的培养基,若颜色不正确,通常是由于pH不正确导致的,加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。
(2)加热过度导致某些成分分解或糖焦化,如SC培养基(SC增菌液)加热过度会变红,含糖量高的培养基,加热过度通常会出现颜色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分变质,如血液久置易变黑,制成的平板颜色偏棕黑色。
02 培养基不凝固或凝固性差
(1)颗粒培养基称量错误
(2)琼脂分布不均匀
(3)培养基pH不正确
(4)培养基加热过度
(5)琼脂量不足
03 培养基产生沉淀
(1)某些培养基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培养基等,配方中含有大量不溶性碳酸钙。
(2)灭菌前未充分溶解,若灭菌前溶解不充足,灭菌后就会出现大量沉淀。
(3)pH不正确,偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。
(4)水的纯度不够,天然水中含有较多的矿物盐离子,若未除净,则易与培养基中反应生成沉淀。
(5)添加剂加入温度不正确,卵黄、血液等对温度敏感的添加成分,若加入时温度过高或温差过大,易出现凝块。
(6)称量错误。
(7)试剂加入顺序不正确。
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革兰氏染色液培养基BCYE琼脂平板(225px) BCYE Agar Base 10个/包
GVPC琼脂平板(225px) GVPC Agar Base 10个/包
我妻氏血琼脂平板(225px) Wagstsuma Blood Agar Base 10个/包
注意事项:
1)培养基尽量使用新鲜培养基,2~4h内用完;
2)上海应使用预还原培养基,预还原24~48h更好;
3)可采用预还原灭菌法制作的培养基(用前于培养基中加入还原剂,如L-半胱氨酸、维生素C等,尽可能使预还原剂处于还原状态);
4)液体培养基应煮沸10min,以驱除溶解氧,并迅速冷却,立即接种医。学教育网搜集整理;
5)厌氧菌的培养基均应营养丰富,并加有还原剂与生长刺激因子(血清、维生素K、氯化血红素、聚山梨酯-80等)。