节杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒

PCR检测试剂盒有效期一般为1年，这是指在适当的储存温度下。核酸扩增部分的试剂一般要贮存于-20℃下，产物检测部分试剂则贮存于2-8℃。尽量避免反复冻融。上海

产品名称：节杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒

英文名称：Arthrobacter spp.

产品货号：LZ-P3232

分类：PCR检测试剂盒

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光，快递免费送货上门。

【结果分析条件设定】

u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。

u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的高点。

【质控标准】

1.  阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；

2.   阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；

3.   以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。

【结果判断】

1.  R阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；

2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；

3.   阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。

PCR反应的特异性决定因素为：

　　　①引物与模板DNA特异正确的结合；

　　　②碱基配对原则；

　　　③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

　　　④靶基因的特异性与保守性。

节杆菌通用其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2)灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

PCR检测步骤:

1、探针法荧光定量PCR样品处理

1）按照GB 4789.10-2016（或SN/T 1870-2016），取样品25g（mL），加入到含有225mL 7.5% NaCl肉汤的无菌容器中均质，调节pH至6.8±0.2。

2）36±1℃培养18-24h。

注：也可参考其他地方标准进行样品的前处理。

2、核酸提取

1）取40μL增菌液于裂解液管中，98℃或沸水浴10min。

2）冷却至室温，吸取上清备用或者置于-20℃保存。

3、反应体系配置

从试剂盒中取出SA预混液，充分融化，短暂离心，然后将阴性对照、样品的DNA提取液、阳性对照各取5μL分别加入PCR管中，盖好管盖，短暂离心，立即进行PCR扩增反应。

4、PCR扩增

PCR管置于PCR仪上，推荐反应程序设定如下：反应体系为25μL，在第二步每个循环60℃时检测荧光信号，检测通道选择FAM。

公司正在出售的产品：

人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA

小鼠高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒 mouse High density lprotein cholesterol,HDL-C ELISA Kit

血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)PCR检测试剂盒 ， PDGF-BB ELISA Kit

MouseCeruloplasmin,CP/CERPCR检测试剂盒小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)PCR检测试剂盒

ELISAKitAβ1-42小鼠β淀粉样蛋白1-42规格：48T/96T

Duckcarbonicanhydrase,CAELISAKit鸭子酶(CA)PCR检测试剂盒

bullfrog growth hormone,GH ELISA Kit 蛙生长激素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC 荧光素标记CD205抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CYP11A1/P450SCC 细胞色素P450 11A1抗体 规格 0.1ml

Mouse IgM/FITC 荧光素标记小鼠IgM 0.3ml

Phospho-LIMK1(Thr508) + LIMK2(Thr505) 英文名称： 0酸化单丝酸蛋白激酶1/2抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh WWOX 包含氧化还原酶的WW域抗体 规格 0.1ml

Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC 荧光素标记CD205抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

节杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒Anti-pre-X protein(NT)/FITC 荧光素标记抗乙肝病毒pre-X蛋白抗体(N端)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rabbit Anti-HRP Whole serum 兔抗HRP抗血清Multi-class antibodies规格： 1ml

白介素10抗体 Anti-IL-10 0.1ml

Donkey anti-Goat IgG whole serum 驴抗羊IgG抗血清 1ml

Phospho-FAK(Tyr576) 英文名称： 0酸化粘着斑激酶抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-PTPN7(Ser246) 0酸化非受体型蛋白酪酸0酸酶7抗体 规格 0.1ml

Rabbit Anti-HRP Whole serum 兔抗HRP抗血清Multi-class antibodies规格： 1ml