甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)染色原理及操作步骤
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甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法) 属一种细胞染色类产品,主要用于生化研究,有效期通常为12个月,关于甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法) 染色原理及操作步骤相关咨讯由上海远慕标准品网提供详细讲述。本司位于上海浦东新区,欢迎来人来电订购!
【信息说明】
产品名称:甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)
供应商:远慕染色液厂家
规格:100ml
分类:细胞染色
储存条件:室温,避光,12个月
用途:细胞核染色、肥大细胞染色
注意事项:硼酸盐溶液配制,甲苯胺蓝中的阳离子与组织细胞的酸性物质结合而被染色。染色结果为:细胞核呈蓝色,而肥大细胞胞质内含有肝素等异色性物质呈异染性紫红色。
【操作步骤】
甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)属细胞染色液类产品,其他操作步骤主要有以下四点进行:
A、肥大细胞染色
1、脱蜡至蒸馏水。
2、根据切片厚度和组织的不同,浸染于甲苯胺蓝染色液。
3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。
4、冰乙酸分化,直到细胞核和颗粒清晰可见。
5、快速和无水乙醇脱水。
6、 二甲苯透明,封固。
染色结果:肥大细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。
B、软骨染色
1、 石蜡切片入二甲苯。
2、 系列乙醇各。
3、 自来水洗。
4、 入Toluidine Blue O Stain,浸染。
5、 自来水洗,滤纸吸干水分。
6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、 逐级乙醇脱水。
8、 二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果:软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。
C、细胞涂片染色
1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。
2、细胞涂片后,立即放入乙醇中固定,取出放在纸巾上。
3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。
4、将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。
5、无需干燥,直接镜检。
染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。
D、原位杂交染色
1、 用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度,凭经验一般稀释比例大于1:100。
2、 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。
3、 在蒸馏水或去离子水浸泡数次。
4、 按需求进行压片固定。
【染色原理】
甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性,更利于组织细胞的着色;甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类;帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。
肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质,遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色,临床上经常用于肥大细胞染色。
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