牛蛋白C(PROC)ELISA试剂盒检测速度快

杨燕燕 | 来源:上海笃玛生物科技有限公司 发布时间:2024-08-06
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品牌 dumabio
型号 96T/48T


牛蛋白C(PROC)ELISA试剂盒 检测速度快



ELISA试剂盒适用行业ELISA试剂盒广泛应用于生命科学研究、临床医学和工业等领域。1.在生命科学研究领域,ELISA试剂盒可以用于检测细胞因子、、酶、等分子的含量和活性,用于学、学、分子生物学等研究领域。2.在临床医学诊断中,ELISA试剂盒可以用于检测中的标志物、、心肌酶等指标,用于临床诊断及监测。3.在食品安全检测中,ELISA试剂盒可以用于检测食品中的残留、残留等有害,用于食品检测和安全评估。4.在监测中,ELISA试剂盒可以用于检测中的化学、微生物等污染物,用于监测和污染治理。5.在动物防控中,ELISA试剂盒可以用于检测动物中的、抗原等指标,用于动物疫病防控和兽药残留检测。总之,ELISA试剂盒在许多行业中都有广泛的应用。



酶联吸附法(ELISA)在多个行业都有应用,特别是在医学和生物技术领域中了广泛应用。以下是一些应用ELISA的行业:1.医学诊断:ELISA被广泛应用于各种和等的诊断,如、、结核病等。在动物检疫方面,ELISA已为广泛采用的,例如用于诊断猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪、蓝舌病等。2.生物技术研发:ELISA可以用于检测生物分子,如蛋白质、多肽、等,在生物医学研究领域广泛应用。例如,在研发中,ELISA可以用于检测的生物活性、与靶点的结合情况等。3.食品安全检测:ELISA可以用于检测食品中的有害,如残留、兽药残留等,保障食品安全。4.监测:ELISA可以用于评估水质、空气等指标,监测状况。总之,酶联吸附法在医学、生物技术、食品安全和监测等领域都有广泛的应用价值。






标记

良好的酶结合物取决于两个条件:即价的和高活性的酶。的活性和纯度对制备标记至关重要,因为特反应随活性和纯度的而增强。在酶标记中,的活性有所,故需要纯度高、效及抗原亲和力强的球蛋白使用亲和层析提纯的,可性,而且可稀释使用,非特吸附。

酶与交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30分钟 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室温放置30分钟后加入含5g纯化的水溶液1ml,混匀并装透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液于4℃冰箱中慢慢搅拌透析6小时(或过夜)使之结合,然后吸出,加(NaBH4)溶液(5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小时,将上述结合物混合液加入等体积饱和铵溶液,置4℃冰箱30分钟后离心,将所得沉淀物溶于少许0.02mol/L、pH7.4PBS中,并对之透析过夜(4℃),次日离心除去不溶物,即酶标,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,进行测定后,冷冻干燥或低温保存。




牛蛋白C(PROC)ELISA试剂盒 检测速度快



ELISA试剂盒的用法包括以下步骤:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml,酶标板中每孔加入50μl,室温、4℃或37℃过夜包被。2.洗涤:弃包被液(拍干,再用无尘纸吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次(每孔均要加满),每次3min~5min。3.封闭:每孔加封闭液(1%BSA)250μl,37℃封闭2h。4.洗涤:用1×PBST洗涤液洗板3次,每次3min~5min。5.加样:加入已经稀释好的样品,37℃反应1h。一般样本加入50-100μl,充分混匀。6.洗涤:用洗涤液洗板3次,每次3min~5min。7.加入酶标试剂:每孔加入100μl酶标溶液,37℃,1h。8.洗涤:用洗涤液洗板3次,每次3min~5min。9.显色:每孔先加入显色剂A液50μl,再加入显色剂B液50μl,37℃避光10-15min。10.终止及测定:加入50μl终止液,终止反应,用酶标仪在450nm波长处测OD值。


酶联吸附法(ELISA)在多个行业都有应用,特别是在医学和生物技术领域中了广泛应用。以下是一些应用ELISA的行业:1.医学诊断:ELISA被广泛应用于各种和等的诊断,如、、结核病等。在动物检疫方面,ELISA已为广泛采用的,例如用于诊断猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪、蓝舌病等。2.生物技术研发:ELISA可以用于检测生物分子,如蛋白质、多肽、等,在生物医学研究领域广泛应用。例如,在研发中,ELISA可以用于检测的生物活性、与靶点的结合情况等。3.食品安全检测:ELISA可以用于检测食品中的有害,如残留、兽药残留等,保障食品安全。4.监测:ELISA可以用于评估水质、空气等指标,监测状况。总之,酶联吸附法在医学、生物技术、食品安全和监测等领域都有广泛的应用价值。效果测定

测定内容包括酶和活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。

⑴ 酶与的活性 常用琼脂扩散或电泳法,使抗原与形成沉淀线,经PBS漂洗1天,再以蒸馏水浸泡1小时,将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色,如果出现应有的颜色反应,再用盐水浸泡,颜色仍然不褪,表示结合物既有酶的活性,也有活性。良好的结合物在显色后,琼扩滴度应在1:16以上。另一个测定是用系列稀释的酶标直接以ELISA进行方阵滴定,此法不仅可以测定标记效果,还可以确定酶标的使用浓度。

⑵ 结合物的定量测定 一般是对结合物中的酶和IgG进行定量测定。常用紫外分光光度计于403nm和280nm进行测定,然后按下列公式计算:

酶量(mg/ml)=OD403×0.42

IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62

对于过碘酸钠氧化法制备的标记量,按下列公式计算:

IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62

已知酶量和IgG量后,即可计算出标记的摩尔(mol)比值。

HRP/IgG摩尔比值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4

结合物中酶总量=HRP(mg/ml)×结合物溶液量

结合物产率=结合物中酶总量/标记时加入的酶量×

用于ELISA的结合物的酶量为400(g/ml时效果一般,为500(g/ml时效果,达 1000(g/ml时效。mol.比值由于结合物中含的IgG并不完全可靠,所以不能作为主要参数。一般认为mol.比值为0.7时效果一般,1.0时效果,1.5-2.0。酶结合率为 7%时效果一般,为9%-10%,达30%以上。



 


90分钟一步法ELISA试剂盒可以适用于、、组织匀浆、细胞上清液等样本类型。这些样本可以用于检测、和其他微生物等病原体,以及、自身性等病理情况。同时,ELISA试剂盒还可以用于检测浓度、维生素等营养,以及污染物等有害的残留量。需要注意的是,不同样本类型和检测项目可能对ELISA试剂盒的灵敏度和特产生影响,因此在选择使用ELISA试剂盒时需要根据具体情况进行选择。


 


ELISA试剂盒用法


 

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