NDF培养基

产品名称：NDF培养基

货号：LZ-PYJ3340

英文名称：见说明

产品规格：500ml

用途:

NDF培养基常与DF培养基、ADF培养基联合使用，用于分析细菌含氮与不含氮以及含ACC的培养效果，菌株置于NDF培养基中的生长要好于DF培养基，说明该菌株能够以铵离子为氮源进行生长。

注意事项：

无菌溶液。主要由盐、、酸、柠檬酸等组成，并含有众多微量元素如锰、铜、铁、锌等金属离子等，经无菌处理，该试剂含铵离子作为氮的来源，不含ACC(又称1-氨基羰酰-1-羧酸)。

储存条件：4℃，6个月

主要包括：

计算—称量—溶解—调pH—分装—灭菌——倒平板等。

计算：，根据配方计算各种营养成分的用量。

称量：使用电子天平准确称取所需，遵循由含量低到含量高的称量原则。

溶解：将称好的成分放入相应玻璃容器中，加入所需量的水，加热使其完全溶解。对于液体培养基，建议使用纯化水。若配制固体培养基，则需称取适量的琼脂放进已称量好的培养基中，继续加热至琼脂全部溶解。

调pH值：待培养基稍冷却后，按配方要求调整pH值。使用10% NaOH溶液（或10% HCl溶液）调整所配培养基的pH。加碱（或酸）溶液时，应边滴加边搅拌，直至后调至要求的pH值。

分装：根据需要将培养基分装于不同的三角烧瓶、试管等。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。分装量根据使用目的和要求决定，但定量分装，便于应用。

灭菌：应按培养基配方中规定的条件及时进行灭菌。普通培养基采用121℃、15min高压湿热灭菌法，以灭菌效果和不损伤培养基的有效成份。

倒平板：灭菌后取出的固体培养基，根据需要可将试管立即斜放，冷凝后即成斜面培养基。液体培养基冷却后可直接根据需要接进菌种。

此外，还包括一些注意事项和操作细节，如使用度1/100的电子天平称取、避免使用铜或铁的容器溶化培养基、调整pH时考虑高压灭菌后的pH变化等。

1、上海准备好干粉培养基、三角瓶、药勺、无菌平皿、油性笔等。在瓶身上标注好培养基的

相关信息。

2、将三角瓶置于电子天平上，调零。按照需要用量，用药勺把干粉培养基添加到三角瓶中。

3、培养基称量之后及时盖上培养基瓶盖，拧紧。用量筒量取适量的蒸馏水或者去离子水。

4、先加入小部分水以湿润干粉，避免粉尘扬起。再加入剩余的水量。充分摇匀。

5、将培养基加热煮至沸腾三次，应可见溶液澄清透亮，无明显琼脂颗粒挂壁，分层等现象。

6、塞上透气硅胶塞，包上牛皮纸或者报纸，包扎好。放入高压灭菌锅中灭菌。（按需设定灭

菌温度、时间）

7、暂时不使用的培养基，可以放入50℃烘箱或者水浴中保温。倒平板时，在超净工作台或

生物安全柜中准备好无菌平皿、记号笔等。

8、颗粒培养基拆开包装后，将无菌培养皿倒置，在底部边缘写上平板相关信息。

9、将标记好的无菌平皿翻转过来，当培养基温度下降到50℃左右时，倾倒培养基。

10、倒完后可轻轻圆周摇晃平板三圈，使平板边缘整齐。将平板铺开可加速琼脂冷却凝固。

11、使用之前，将平板倒置于无菌实验室内的烘箱中，55℃、15 分钟。烘干平板表面水分。

12、将暂时不使用的平板用报纸包成筒状，用记号笔标清楚平板的种类、配制日期。

13、然后放进2-8℃的冰箱中保存。用时取出放置室温下平衡，使用前50℃烘箱烘10 分钟。

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